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颖颖贝

铜虫 (小有名气)

[求助] SDS聚丙烯酰胺电泳的电压选择

我的蛋白质在20-50kda之间,用的是12%的胶,应该用多大的电压,跑多长时间才合适啊?
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muyanshuang

木虫 (正式写手)


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 应助指数-1, 谢谢参与,不过回帖更倾向于交流,而不是应助:楼主问电压 2013-05-24 07:51:58
一般为20mA,60min。
2楼2013-05-23 12:22:04
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不转录的DNA

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-05-24 07:52:12
SDS-PAGE的电压选择!浓缩胶的电压是60V,跑到分离胶与浓缩胶分界线下面一点!
改为100V~120V之间的电压跑到距离最底下1cm!时间的长短在于你分离胶的长短!这个时间是没有办法确定的!就像15cm和20cm的分离胶电泳时间长短是不一样的!
长得比我英俊的,没我有才华!有才华的,没我长得俊!
3楼2013-05-23 12:30:32
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颖颖贝

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 不转录的DNA at 2013-05-23 12:30:32
SDS-PAGE的电压选择!浓缩胶的电压是60V,跑到分离胶与浓缩胶分界线下面一点!
改为100V~120V之间的电压跑到距离最底下1cm!时间的长短在于你分离胶的长短!这个时间是没有办法确定的!就像15cm和20cm的分离胶电泳 ...

跑到距离最底下1cm?可是书上写的是到溴酚蓝到达胶的最底部。
还有一个问题,就是溴酚蓝在12%的胶里相当于多大的蛋白啊?
4楼2013-05-24 10:52:44
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不转录的DNA

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 颖颖贝 at 2013-05-24 10:52:44
跑到距离最底下1cm?可是书上写的是到溴酚蓝到达胶的最底部。
还有一个问题,就是溴酚蓝在12%的胶里相当于多大的蛋白啊?...

跑到距离最底下1cm 这只是经验之谈!相信你选择的,单纯的书本知识在现在已经不能说明问题了!书本的知识只是过去得到肯定的学识!最新的理论应该是在科学的paper上!(好吧!我又扯远了!

溴酚蓝的分子量是670.02,也就是相当于670.02Da!所以你懂了吧!至于相对分子量和道尔顿之间的关系我就不解释了!你可以搜索一下我以给别人的解释!你也可以百度一下!



好吧!就这么多吧!希望对你有用!
长得比我英俊的,没我有才华!有才华的,没我长得俊!
5楼2013-05-24 11:21:17
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颖颖贝

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 不转录的DNA at 2013-05-24 11:21:17
跑到距离最底下1cm 这只是经验之谈!相信你选择的,单纯的书本知识在现在已经不能说明问题了!书本的知识只是过去得到肯定的学识!最新的理论应该是在科学的paper上!(好吧!我又扯远了!

溴酚 ...

哦,这样啊。 谢谢啦!
6楼2013-05-27 16:20:13
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treetreew

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我都90 150
放心跑,着急的话200跑到底
7楼2013-06-08 09:18:08
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