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DNA电泳图分析求助
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776142
金虫
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(幼儿园)
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帖子: 367
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虫号: 774110
[交流]
DNA电泳图分析求助
跑了很多次从DH5a大肠杆菌中用合成的萃取材料分离出的DNA电泳,总是出现问题,操作是按照碱法裂解的方法配制溶液1,2,3同时在1中加入RNA酶,然后用合成的材料吸附洗脱,但在200处左右总出现很亮的条带,加大RNA酶的浓度也无法解决,并且跑出的DNA条带与试剂盒得到的最亮条带也不在一条直线上,不知道是不是我用1M的NaCl洗脱后的结果,希望明白的朋友们能够帮忙解决下,不尽感激。
图片3.jpg
[
Last edited by 776142 on 2013-5-21 at 10:02
]
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2013-05-21 10:00:50
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huoyongting
金虫
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在线: 110.2小时
虫号: 1351186
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
22楼
:
Originally posted by
field0073
at 2013-05-22 22:32:50
200bp的条带应该不是RNA,首先RNA容易降解,图谱中如果是RNA应该很弥散,而不是这么均一(虽然也模糊);再者,已经用RNA酶处理过,楼上有人说RNA酶可能失活,其实RNA酶很难灭活,并且酶活力较高,所以很有可能不是 ...
16楼说的是引物二聚体,引物哪里来的,而且条带明显在200以下
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23楼
2013-05-23 08:17:15
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youngker918
金虫
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★ ★
776142(金币+1): 谢谢参与
776142(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。
2013-05-21 13:18:57
有可能啊,建议你氯化钠洗脱后再做下脱盐
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3楼
2013-05-21 10:49:53
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孤城一片
木虫
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★ ★
776142(金币+1): 谢谢参与
776142(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流经验!
2013-05-22 00:59:58
我以前做的时候也是这样,我一开始也是RNA酶加的量很大,后来我一般是大提,然后做一次回收,效果还行
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6楼
2013-05-21 14:04:21
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776142
金虫
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3楼
:
Originally posted by
youngker918
at 2013-05-21 10:49:53
有可能啊,建议你氯化钠洗脱后再做下脱盐
能告诉下具体的除盐过程吗,刚接触这一领域不太懂,谢谢。我是用300微升的1M氯化钠洗脱的,
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7楼
2013-05-21 14:17:39
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