应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA电泳图分析求助
51/1返回列表
查看: 9047  |  回复: 30
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

776142

金虫 (正式写手)

[交流] DNA电泳图分析求助

跑了很多次从DH5a大肠杆菌中用合成的萃取材料分离出的DNA电泳，总是出现问题，操作是按照碱法裂解的方法配制溶液1,2,3同时在1中加入RNA酶，然后用合成的材料吸附洗脱，但在200处左右总出现很亮的条带，加大RNA酶的浓度也无法解决，并且跑出的DNA条带与试剂盒得到的最亮条带也不在一条直线上，不知道是不是我用1M的NaCl洗脱后的结果，希望明白的朋友们能够帮忙解决下，不尽感激。
DNA电泳图分析求助
图片3.jpg



[ Last edited by 776142 on 2013-5-21 at 10:02 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-05-21 10:00:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

field0073

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-27 22:27:12
引用回帖:
19楼: Originally posted by huoyongting at 2013-05-22 15:20:35
RNA酶的作用时间可以长一点或者买好一点的RNA酶，然后如果是异丙醇加的量太多的话也会有RNA污染的，跟试剂盒相比的话你的条带大部分是线性化的了，可能是你加二液的时候混匀的过于剧烈了，这个注意下就好了，祝好运

200bp的条带应该不是RNA，首先RNA容易降解，图谱中如果是RNA应该很弥散，而不是这么均一（虽然也模糊）；再者，已经用RNA酶处理过，楼上有人说RNA酶可能失活，其实RNA酶很难灭活，并且酶活力较高，所以很有可能不是RNA. 我比较同意16楼说的，可能在提取过程中震荡剧烈导致DNA断裂，并且图片也说明你的目的条带与试剂盒上所给不一致，再次做的时候不要震混，多次颠倒混匀即可。
赞一下 回复此楼
22楼2013-05-22 22:32:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 31 个回答

youngker918

金虫 (正式写手)
★ ★
776142(金币+1): 谢谢参与
776142(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-21 13:18:57
有可能啊，建议你氯化钠洗脱后再做下脱盐
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-21 10:49:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孤城一片

木虫 (小有名气)
★ ★
776142(金币+1): 谢谢参与
776142(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流经验！ 2013-05-22 00:59:58
我以前做的时候也是这样，我一开始也是RNA酶加的量很大，后来我一般是大提，然后做一次回收，效果还行
赞一下 回复此楼
6楼2013-05-21 14:04:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

776142

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by youngker918 at 2013-05-21 10:49:53
有可能啊，建议你氯化钠洗脱后再做下脱盐

能告诉下具体的除盐过程吗，刚接触这一领域不太懂，谢谢。我是用300微升的1M氯化钠洗脱的，
赞一下 回复此楼
7楼2013-05-21 14:17:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 31 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:12 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:07 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 08:06 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:52 by vs90ilomwc
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:46 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:32 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:07 by vs90ilomwc
[硕博家园] 博士延得我，科研能力直往上蹿 +8 偏振片 2026-02-02 8/400 2026-02-08 06:52 by liyeqik
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 3/150 2026-02-08 02:52 by vs90ilomwc
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 02:45 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:27 by vs90ilomwc
[教师之家] 有院领导为了换新车，用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗 +4 hitsdu 2026-02-06 4/200 2026-02-07 13:07 by jurkat.1640
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[考博] 天津大学招2026.09的博士生，欢迎大家推荐交流（博导是本人） +4 a793625982 2026-02-05 5/250 2026-02-07 10:57 by a793625982
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生｜MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[基金申请] 面上项目申报 +3 Tide man 2026-02-01 3/150 2026-02-05 22:56 by god_tian
[教师之家] 遇见不省心的家人很难过 +18 otani 2026-02-03 22/1100 2026-02-04 11:06 by tangmnt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭