24小时热门版块排行榜    

查看: 1814  |  回复: 3

wzp9012

铁虫 (著名写手)

[求助] 请教定点突变的突变点如何选取

本人接下来要做定点突变实验,但对于突变点的选择上不太明白,有没有做过类似实验的师兄师姐,望帮帮忙,告知些突变点的选择方法
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-05-15 01:17:10
wzp9012: 金币+5 2013-05-17 17:32:13
楼主给你信息不太够. 你的问题是不是要问怎么选要改的地方?
我想问的是, 你要改的是蛋白的序列看对功能的影响还是改启动子什么的看对基因表达的影响?
如果是前者你一般需要参考对这个蛋白已经发表的文献来猜测那些氨基酸对蛋白的功能有决定性影响, 如果是后者你需要做一些前期工作大致地定位控制基因表达的motif. 有了这些信息才好知道需要改的序列在哪里, 也才能相应的设计引物.
2楼2013-05-13 15:50:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzp9012

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-05-13 15:50:49
楼主给你信息不太够. 你的问题是不是要问怎么选要改的地方?
我想问的是, 你要改的是蛋白的序列看对功能的影响还是改启动子什么的看对基因表达的影响?
如果是前者你一般需要参考对这个蛋白已经发表的文献来猜测那 ...

嗯,就是想知道要突变的碱基位点如何选取得,新手,太多的地方不了解,谢谢你的提醒,见谅。主要目的是提高酶的活性和热稳定性。是不是要通过模型分析呢
3楼2013-05-16 15:56:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by wzp9012 at 2013-05-16 15:56:01
嗯,就是想知道要突变的碱基位点如何选取得,新手,太多的地方不了解,谢谢你的提醒,见谅。主要目的是提高酶的活性和热稳定性。是不是要通过模型分析呢...

楼主原来要提高酶的功能啊, 这个我建议用盲选的办法, 就是分子进化法. 楼主先建立一个高通量的酶功能检测系统, 然后用易错PCR(error-prone PCR)产生大量的随即突变, 然后用你的系统去筛.
4楼2013-05-16 16:14:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wzp9012 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +18 rare12345 2026-03-18 18/900 2026-03-19 22:36 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +3 葵梓卫队 2026-03-18 5/250 2026-03-19 19:35 by 给你你注意休息
[考研] 332求调剂 +3 ydfyh 2026-03-17 3/150 2026-03-19 10:14 by 功夫疯狂
[考研] 0817调剂 +3 没有答案_ 2026-03-14 3/150 2026-03-19 09:51 by Xu de nuo
[考研] 化学工程321分求调剂 +15 大米饭! 2026-03-15 18/900 2026-03-18 14:52 by haxia
[考研] 0703化学336分求调剂 +6 zbzihdhd 2026-03-15 7/350 2026-03-18 09:53 by zhukairuo
[考研] 环境工程调剂 +8 大可digkids 2026-03-16 8/400 2026-03-18 09:36 by zhukairuo
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 材料与化工专硕调剂 +5 heming3743 2026-03-16 5/250 2026-03-17 14:03 by 勇敢太监王公公
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
信息提示
请填处理意见