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l刘莉娜

新虫 (小有名气)

[交流] 重组质粒的构建 已有2人参与

我现在有两个质粒A和B 大小分别为5Kb和10Kb,我想把A(大小5Kb)的目的基因去掉,切掉后A大小为2.4Kb,然后把B的目的基因(大小7Kb)连到去掉目的基因后的A片段上,因为目的基因片段较大(7Kb),质粒片段相对较小(2.4Kb),不知道能不能行得通,希望大家给点建议!
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gyesang

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流,期待你的精彩1 2013-05-06 14:44:30
这个连接应该是没有太大的问题的,有很多克隆方法可以实现
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-05-06 14:38:04
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l刘莉娜

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-05-06 14:38:04
这个连接应该是没有太大的问题的,有很多克隆方法可以实现

谢谢,我们现在特别想用这个方法,但是师兄担心目的片段比质粒片段大的太多怕行不通到时费时费力。
3楼2013-05-06 16:04:16
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l刘莉娜

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-05-06 14:38:04
这个连接应该是没有太大的问题的,有很多克隆方法可以实现

载体A上的目的基因用酶切切下来去掉,然后载体B上的目的基因PCR扩增出来后,两者连接,能行的通吗?
4楼2013-05-06 16:17:18
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liyu0355

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼上的方面,是可行的.
5楼2013-05-06 19:33:46
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l刘莉娜

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-05-06 19:33:46
楼上的方面,是可行的.

谢谢,我先试一试看!
6楼2013-05-06 21:56:31
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