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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 重组质粒的构建
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l刘莉娜

新虫 (小有名气)

[交流] 重组质粒的构建 已有2人参与

我现在有两个质粒A和B 大小分别为5Kb和10Kb，我想把A（大小5Kb）的目的基因去掉，切掉后A大小为2.4Kb，然后把B的目的基因（大小7Kb）连到去掉目的基因后的A片段上，因为目的基因片段较大（7Kb)，质粒片段相对较小（2.4Kb),不知道能不能行得通，希望大家给点建议！
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1楼 2013-05-06 14:25:13
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-05-06 14:44:30
这个连接应该是没有太大的问题的，有很多克隆方法可以实现
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-05-06 14:38:04
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l刘莉娜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-05-06 14:38:04
这个连接应该是没有太大的问题的，有很多克隆方法可以实现

谢谢，我们现在特别想用这个方法，但是师兄担心目的片段比质粒片段大的太多怕行不通到时费时费力。
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3楼2013-05-06 16:04:16
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l刘莉娜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-05-06 14:38:04
这个连接应该是没有太大的问题的，有很多克隆方法可以实现

载体A上的目的基因用酶切切下来去掉，然后载体B上的目的基因PCR扩增出来后，两者连接，能行的通吗？
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4楼2013-05-06 16:17:18
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liyu0355

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼上的方面,是可行的.
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5楼2013-05-06 19:33:46
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l刘莉娜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-05-06 19:33:46
楼上的方面,是可行的.

谢谢，我先试一试看！
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6楼2013-05-06 21:56:31
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