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jkamm

金虫 (正式写手)

[求助] WHY,WHY,WHY

相同体系,相同加样量,第一次PCR成功,往后就P不出来,各种原因都在找,崩溃了。。。我做了模板梯度,没有目的条带,小片段确有二条,晕啊,请问下前辈,怎么出现二小片段条带,我的目的片段为何不出来,是TAQ酶出问题?

I1(0-7)I2(0-1)  2013-05-02 16 小时 02 分钟.jpg
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ljj0609

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jkamm(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流经验! 2013-05-06 01:52:42
有条件的话,换酶试试吧。当初我提了半个月的模板,一提就是一天啊,pcr时有时无,老师说模板有问题。。。。。又一次,用了别的酶液,,,,,结果特别好。苦啊
3楼2013-05-05 21:25:52
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liang85h

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jkamm(gyesang代发): 金币+1, 鼓励发贴交流,为楼主问题解决提供可能的线索! 2013-05-06 01:52:27
模板换一下,最好!!!你用的DNA?cDNA?
2楼2013-05-05 18:21:49
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liang85h

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ljj0609 at 2013-05-05 21:25:52
有条件的话,换酶试试吧。当初我提了半个月的模板,一提就是一天啊,pcr时有时无,老师说模板有问题。。。。。又一次,用了别的酶液,,,,,结果特别好。苦啊

有时候酶保真性不好的时候,就有可能扩出来!
4楼2013-05-06 16:46:39
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