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xieweijing

金虫 (正式写手)

[求助] 土壤总DNA提取图

用OMEGA试剂盒对土壤进行总基因组DNA进行提取,提出来了但是效果不好,PCR总p不出来
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好好加油,为自己,也为自己以后!
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sunnyface

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xieweijing: 金币+1, 有帮助 2013-04-27 17:16:27
土壤腐殖质太多,试剂盒提取后抑制因子去除不干净,建议用纯化试剂盒纯化,我们一般用mobio试剂盒纯化。
2楼2013-04-27 10:10:55
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xieweijing

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sunnyface at 2013-04-27 10:10:55
土壤腐殖质太多,试剂盒提取后抑制因子去除不干净,建议用纯化试剂盒纯化,我们一般用mobio试剂盒纯化。

纯化后模板会不会损失啊
好好加油,为自己,也为自己以后!
3楼2013-04-27 11:06:10
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shengwuhj

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xieweijing: 金币+1, 有帮助 2013-04-27 17:16:07
OMEGA的试剂盒都不给力,建议直接用mibio的DNA提取试剂盒,好像是2300,50次
4楼2013-04-27 17:05:55
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xieweijing: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-04-27 23:10:23
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-04-28 11:05:03
mobio 的 试剂盒提DNA 应该没问题

OMEGA 的据说 效果也不错。根据你的土壤样品种类,如果你 估计微生物特别丰富的话 建议你按照试剂盒说明书上 的 土壤量 减半 甚至减少到四分之一 试试。

如果是玻璃珠振荡法,不妨适当验证震荡时间 或者加强震荡强度。

很多时候 别总担心样品量少了 提不出来影响后面实验,往往是因为样品量多了 试剂盒提供的试剂处理能力有限。

况且 PCR 的时候 是很灵敏的。
5楼2013-04-27 22:02:32
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xieweijing

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 老夏853 at 2013-04-27 22:02:32
mobio 的 试剂盒提DNA 应该没问题

OMEGA 的据说 效果也不错。根据你的土壤样品种类,如果你 估计微生物特别丰富的话 建议你按照试剂盒说明书上 的 土壤量 减半 甚至减少到四分之一 试试。

如果是玻璃珠振荡法 ...

谢谢了,我去试试
好好加油,为自己,也为自己以后!
6楼2013-04-27 23:10:12
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