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sys0610

铜虫 (初入文坛)

[求助] 请教cDNA-AFLP的定量问题

我在做cDNA-AFLP，反转录用的TAKARA的试剂盒要求加2μg Template RNA，而mRNA只占Total RNA的不到1~4%，纯化用的Promega的试剂盒纯化效率好像也不是很高。我现在需要定量cDNA。所以想请教：
1.如果反转录加2μg，我第一步提的Total RNA定量应该多少？是按mRNA的含量算要50~200μg吗？不靠谱吧？
2.如果RNA没定量，cDNA怎么定量？含量太少了，除了测定吸光度值，有更好的方法吗？
3.非要测吸光度值的话，和RNA一样测OD260/OD280吗？浓度计算公式也是一样的吗？


没有在做cDNA-AFLP的吗？还是我这问题不值得回答？

求赐教~~~！！！

谢谢

[ Last edited by sys0610 on 2013-5-10 at 15:27 ]
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1楼 2013-04-24 21:37:33
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1030694963

银虫 (小有名气)
你的问题解决了吗？我也遇到了同样的问题，你是怎么解决的？
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2楼2014-10-20 14:44:12
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