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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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sys0610

铜虫 (初入文坛)

[求助] 请教cDNA-AFLP的定量问题

我在做cDNA-AFLP,反转录用的TAKARA的试剂盒要求加2μg Template RNA,而mRNA只占Total RNA的不到1~4%,纯化用的Promega的试剂盒纯化效率好像也不是很高。我现在需要定量cDNA。所以想请教:
1.如果反转录加2μg,我第一步提的Total RNA定量应该多少?是按mRNA的含量算要50~200μg吗?不靠谱吧?
2.如果RNA没定量,cDNA怎么定量?含量太少了,除了测定吸光度值,有更好的方法吗?
3.非要测吸光度值的话,和RNA一样测OD260/OD280吗?浓度计算公式也是一样的吗?


没有在做cDNA-AFLP的吗?还是我这问题不值得回答?

求赐教~~~!!!

谢谢

[ Last edited by sys0610 on 2013-5-10 at 15:27 ]
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1030694963

银虫 (小有名气)

你的问题解决了吗?我也遇到了同样的问题,你是怎么解决的?
2楼2014-10-20 14:44:12
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