应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 芽孢杆菌敲除问题
51/1返回列表
查看: 2211  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zd0017

铁虫 (小有名气)

[求助] 芽孢杆菌敲除问题

本人想做萎缩芽孢杆菌的基因筛选，想用新霉素做抗性筛选，现在手里有一个带有新霉素基因的质粒，但是不知道如何把该基因扩下来，是要扩多长可以做抗性筛选，要把启动子也扩出来吗？诚心求助大牛指教！！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-22 16:43:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhenfanren

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhangxingc: 金币+2, 鼓励新虫发帖应助，欢迎常到微生物版 2013-04-28 10:11:04
基因不能随便扩，就算扩了启动子，也未必可以在Bt里表达，这个基因最好是Bt里的，或是已经在BT里成功表达过了。
赞一下 回复此楼
6楼2013-04-23 14:55:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

wuguang2013

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-05-15 13:46:51
做基因敲除的方法很多，最常见的就是转座子敲除，但是我最近在做双交换敲除法，用到两个文献，一个是关于自杀性质粒，一个是双交换敲除原理的，你可以试着看看。希望对你有帮助！
赞一下(1人) 回复此楼
乐天派广！牙齿天天晒太阳！！！
2楼2013-04-22 20:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zd0017

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wuguang2013 at 2013-04-22 20:49:37
做基因敲除的方法很多，最常见的就是转座子敲除，但是我最近在做双交换敲除法，用到两个文献，一个是关于自杀性质粒，一个是双交换敲除原理的，你可以试着看看。希望对你有帮助！

谢谢你啊，能否把这两篇文献发给我一下！！
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-23 10:48:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dmzha

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你知道质粒的序列吗？如果知道就方便了，要把新霉素基因自身的所有序列都扩出来，包括上游的启动子序列（尽量往前都扩点）和后下游的终止序列（尽量往后多扩点）。我就是采用这样的策略从pET-28a中扩的卡纳抗性基因的，希望对你有用。
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-23 11:33:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭