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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于枯草芽孢杆菌计数以及生长曲线的制作问题
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洛克公园

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于枯草芽孢杆菌计数以及生长曲线的制作问题 已有1人参与

我想问下枯草芽孢杆菌能用血球计数板计数么？我师兄一直那么做的，但是我做的时候根本在显微镜下只能看到黑色的小点点，完全不能辨别是不是杂质啊什么的，然后跟舍友讨论，舍友说不能用血球计数板的呀。。。我好迷茫啊.。。求高手指教下啊
另外导师想让我做那个我们那株枯草芽孢杆菌的生长曲线。。。我听说貌似有这么一种仪器，就是随时可以读出OD值的，不用从摇床取出来然后倒到比色皿那样去测，那样肯定省事很多的，但是这种仪器真的存在吗？叫咩咧？
本人金币不多，只能悬赏这么多啦。。。大侠们速速伸出援手吧，跪求指教啊

[ Last edited by 洛克公园 on 2012-9-19 at 14:45 ]
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小桥流水人家
1楼 2012-09-19 14:44:35
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

颖芝麻

新虫 (正式写手)
不过那个是十年前的15W了……
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︶你一点都不在意我︶多说一句话都觉得奢侈︶我也觉得奢侈︶因为我不知道怎么组织语言与你沟通︶
7楼2012-09-20 17:42:43
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颖芝麻

新虫 (正式写手)
貌似我见过一种小发酵罐，特别复杂，有几十个开关，连着电脑然后有OD读数。。。。不知道你说的是不是那个。。。标价15W多
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︶你一点都不在意我︶多说一句话都觉得奢侈︶我也觉得奢侈︶因为我不知道怎么组织语言与你沟通︶
6楼2012-09-20 17:41:51
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lark001

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先枯草芽孢杆菌能用血球计数板计数的，楼主所说的小黑点可能是细菌，至于杂质干扰，可以用染色剂（如SYBR类）染色，再在荧光显微镜下数（不能区分死亡细胞与活体细胞），这样利用染色剂对核苷酸的亲和力，将细胞与杂质（非生物类）区分开。
至于直接做细胞生长曲线的仪器，应当是流质细胞仪（会贵一点），如果不怕麻烦，也可以用分光光度计来测OD值，excel、origin绘制。
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8楼2012-09-20 20:48:30
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
测个生长曲线都这么麻烦，随便一本微生物书上都有的，直接取样，测OD600或者离心测湿重，作图就可以了。也没多长时间。
血球计数板 稀释计数，测那些东西不嫌累吗，光准备东西都一大堆，最后的结果和测量湿重or吸光度曲线都是一样的。
没经验的梯度稀释测细菌数结果还不是很好。
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10楼2012-09-21 14:47:21
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普通回帖

黑色de星期⑧

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个仪器有，我们实验室准备买回来，不过好像忘了叫什么名字了关于血球计数板可以对枯草芽孢杆菌计数，我们也用过这种方法，你说的黑点应该是杂质吧。
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2楼2012-09-19 22:47:22
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洛克公园

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 黑色de星期⑧ at 2012-09-19 22:47:22
这个仪器有，我们实验室准备买回来，不过好像忘了叫什么名字了关于血球计数板可以对枯草芽孢杆菌计数，我们也用过这种方法，你说的黑点应该是杂质吧。

我导师没钱 什么都是借别的实验室的 估计买不起了 不过等你知道了告诉我名字也好呀 还有 用血球计数板计数的话 枯草芽孢杆菌应该是什么样子的啊第一次做微生物 不懂
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小桥流水人家
3楼2012-09-19 23:49:18
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younx

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不测OD值得花可以用用平皿法，麻烦点。定时从培养液中取出一毫升，10倍稀释到一定浓度后浇培养基生长且做多个平行，计算出大概平均菌落数即可得到原培养液中菌浓度
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4楼2012-09-20 08:36:00
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余香rose

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你觉得你导师会因为你测一次OD给你买OD检测仪器么？这不光是价格的问题，还是使用频率的问题；至于计数可以用稀释涂布法，就是费时间一些
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5楼2012-09-20 17:03:20
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foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 颖芝麻 at 2012-09-20 17:42:43
不过那个是十年前的15W了……

什么罐罐啊？
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9楼2012-09-21 08:56:03
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