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rzhdw

铜虫 (小有名气)

[求助] 如何从稀菌液中有效分离大肠杆菌菌体?

本人实验中所用的大肠杆菌悬浮液浓度约为7次方cfu/ml(0.2M NaNO3中), 现在想从该菌液(5ml)中分离出菌体,后续步骤为细胞破壁,提取蛋白,测试相关酶活。试过离心,不能有效分离(实验需要相对准确定量),请教各位大神!
另外,用超滤管分离细菌是否可行呢?
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chshen06188

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-04-17 15:00:11
超滤管分离细菌可行
竹杖芒鞋轻胜马,一蓑风雨任平生。
2楼2013-04-16 16:18:34
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rzhdw

铜虫 (小有名气)

谢谢回复,不过超滤管操作相对复杂,有没有更简单快速的分离方法呢?
3楼2013-04-16 19:00:03
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linwenbin

铁虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhangxingc: 金币+4, 鼓励新虫发帖应助,欢迎常到微生物版 2013-04-18 09:00:57
有超滤管分离效果非常不错,,配个管道泵就可以了
4楼2013-04-17 10:07:05
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rzhdw

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by linwenbin at 2013-04-17 10:07:05
有超滤管分离效果非常不错,,配个管道泵就可以了

谢谢,管道泵做什么用的?
5楼2013-04-17 17:08:11
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chshen06188

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by rzhdw at 2013-04-16 19:00:03
谢谢回复,不过超滤管操作相对复杂,有没有更简单快速的分离方法呢?

要通过试验确定工艺条件。加个加压泵,不复杂,流程很简单,就是控制压力和观察通量变化。
竹杖芒鞋轻胜马,一蓑风雨任平生。
6楼2013-04-17 23:44:51
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linwenbin

铁虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
rzhdw: 金币+10, 有帮助 2013-04-25 18:45:41
最简单的就是配个管道和泵。要更精确的就再配些仪表。这样实验数据就更准确。超滤膜对大肠杆菌的截留率可达到100%。
7楼2013-04-18 09:06:01
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民以食为天

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
10倍稀释法后,到平板,在平板固体培养基上划线分离,进行纯种培养,形成单一的菌落,不可以做后续实验吗?
民以食为天,食以安为先。
8楼2013-04-18 09:58:45
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tiu007

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
直接用0.22微米滤膜抽滤,抽滤完后连同滤膜一块超声破碎就行了!
9楼2013-04-18 15:44:16
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rzhdw

铜虫 (小有名气)

多谢各位,已经用超滤管分离了,效果还可以!
10楼2013-04-25 18:40:50
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