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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何从稀菌液中有效分离大肠杆菌菌体？
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rzhdw

铜虫 (小有名气)

[求助] 如何从稀菌液中有效分离大肠杆菌菌体？

本人实验中所用的大肠杆菌悬浮液浓度约为7次方cfu/ml（0.2M NaNO3中）, 现在想从该菌液（5ml）中分离出菌体，后续步骤为细胞破壁，提取蛋白，测试相关酶活。试过离心，不能有效分离（实验需要相对准确定量），请教各位大神！
另外，用超滤管分离细菌是否可行呢？
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1楼 2013-04-15 21:41:28
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chshen06188

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-04-17 15:00:11
超滤管分离细菌可行
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竹杖芒鞋轻胜马，一蓑风雨任平生。
2楼2013-04-16 16:18:34
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rzhdw

铜虫 (小有名气)
谢谢回复，不过超滤管操作相对复杂，有没有更简单快速的分离方法呢？
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3楼2013-04-16 19:00:03
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linwenbin

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhangxingc: 金币+4, 鼓励新虫发帖应助，欢迎常到微生物版 2013-04-18 09:00:57
有超滤管分离效果非常不错，，配个管道泵就可以了
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4楼2013-04-17 10:07:05
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rzhdw

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by linwenbin at 2013-04-17 10:07:05
有超滤管分离效果非常不错，，配个管道泵就可以了

谢谢，管道泵做什么用的？
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5楼2013-04-17 17:08:11
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chshen06188

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by rzhdw at 2013-04-16 19:00:03
谢谢回复，不过超滤管操作相对复杂，有没有更简单快速的分离方法呢？

要通过试验确定工艺条件。加个加压泵，不复杂，流程很简单，就是控制压力和观察通量变化。
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竹杖芒鞋轻胜马，一蓑风雨任平生。
6楼2013-04-17 23:44:51
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linwenbin

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
rzhdw: 金币+10, ★有帮助 2013-04-25 18:45:41
最简单的就是配个管道和泵。要更精确的就再配些仪表。这样实验数据就更准确。超滤膜对大肠杆菌的截留率可达到100%。
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7楼2013-04-18 09:06:01
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民以食为天

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
10倍稀释法后，到平板，在平板固体培养基上划线分离，进行纯种培养，形成单一的菌落，不可以做后续实验吗？
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民以食为天，食以安为先。
8楼2013-04-18 09:58:45
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tiu007

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
直接用0.22微米滤膜抽滤，抽滤完后连同滤膜一块超声破碎就行了！
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9楼2013-04-18 15:44:16
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rzhdw

铜虫 (小有名气)
多谢各位，已经用超滤管分离了，效果还可以！
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10楼2013-04-25 18:40:50
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