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taichi

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】微生物菌体离心离不下来

ATT,以8000r/min的离心速度,都无法将菌体使发酵液上清液变清,离心后有部分沉淀,不知道是不是因为染菌了,请教各位同胞呀!
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ananjsq

木虫 (正式写手)

★
silicare(金币+1):谢谢参与 2010-10-28 11:43:42
再将速度调大试试,10000rpm。或是用微孔滤膜过滤,如果要的是滤液的话。
2楼2010-10-13 16:14:50
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yanglq1985

银虫 (小有名气)

★ ★
scelab(金币+2):有道理 2010-11-18 23:39:31
你没说离心时间,离心杯的大小,离心杯越大用的时间越长,而且离心后要立刻分离,否则菌体又会悬浮到上清液中。还有可能你得到的沉淀不是菌体。
3楼2010-10-13 19:53:45
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

★ ★
scelab(金币+2):good 2010-11-18 23:39:50
解决的办法:一个是将沉淀和上清液都取来分别在显微镜下观察,看上清液是否有菌,如果有倍数关系是多少,还有就是形态相同不,如果相同就加大转速或者增加时间,如果不是的话就说明是不同菌,或者就是染菌了 啊。
4楼2010-10-13 19:59:41
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

不知道你的是什么菌,有的菌或产生鼻涕装的多糖类物质,我曾经14000r离心40min都没有离心沉淀下来。。。。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2010-10-13 20:42:27
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王家大成

木虫 (正式写手)

囧囧小虫

莫非菌体自溶了?
一念起,万水千山;一念灭,沧海桑田!
6楼2010-10-13 20:49:41
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wentanbaodao

铁杆木虫 (正式写手)

★
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-14 10:57:25
我知道一种情况,就是菌丝本来就很难离心下来,粘稠之类的,你可以加一些絮凝剂,比如Al2(SO4)3试一试吧,效果很好,我有的菌液有很多油,我就是这么弄得,发酵液很清
7楼2010-10-14 10:34:54
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fjt198719

木虫 (著名写手)

永远的菜鸟

★
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-14 10:57:38
如果发酵液是粘稠状的,最好加酸,使其变稀,离心12000,10来分钟足够,如果要上清的话,在用碱调回来就可以了
独YY不如众YY!!!
8楼2010-10-14 10:44:56
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qindong413

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-10-13 20:42:27:
不知道你的是什么菌,有的菌或产生鼻涕装的多糖类物质,我曾经14000r离心40min都没有离心沉淀下来。。。。

那请问您最终采用什么方法除掉的菌体啊,估计这种情况下过膜也过不动吧。我也碰到了这样的问题,请问有什么有效办法吗,我的就是非常粘稠的多糖
9楼2010-10-28 10:22:08
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微笑漩涡

新虫 (著名写手)

★
scelab(金币+1):谢谢交流 2010-11-18 23:40:12
引用回帖:
Originally posted by qindong413 at 2010-10-28 10:22:08:

那请问您最终采用什么方法除掉的菌体啊,估计这种情况下过膜也过不动吧。我也碰到了这样的问题,请问有什么有效办法吗,我的就是非常粘稠的多糖

是的,过膜是不行的,我后来就没有继续做那株菌了,用另外的代替了。我也不知道什么方法能有效地去除多糖,你可以试试PVPP,聚乙烯吡咯烷酮能够去除一部分多糖,但是这么高浓度的我不确定能不能去除。。
10楼2010-10-28 10:25:11
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