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许老板

金虫 (小有名气)

[求助] 胶原蛋白的提取前处理,除脂

用猪皮提取胶原蛋白的时候,前处理有多种前处理除脂方法,想问一下各种方法的原理还有优缺点。
   1,新鲜猪皮切5mm以下薄片,生理盐水反复浸泡。
   2,新鲜猪皮用氯仿/乙醇(2:1)脱脂,切除皮下脂肪,捣碎除脂4.5mol/LNaCl的0.05mol/LTris-HCl(PH=7.5)充分洗涤。
   3,新鲜猪皮切薄片,35℃清水洗涤两次,4~5倍40℃温水和脱脂液(80%Na2CO3)洗一次,10min后滤去水,重复一次,最后用清水洗两次。
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许老板

金虫 (小有名气)

在粗提胶原蛋白溶液除杂浓缩时有很多文献提到在溶液中缓慢加入1mol/L的NaOH溶液,调节pH到6或者5,然后再加氯化钠固体粉末,缓慢搅拌,4℃静置过夜保存。这一步的作用是什么?除酶吗?还有氯化钠固体需要多少(以100g猪皮计算)?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
8楼2013-04-09 18:30:52
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查看全部 9 个回答

fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
许老板: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 感谢感谢 2013-04-08 18:29:39
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-04-09 00:18:40
1,新鲜猪皮切5mm以下薄片,生理盐水反复浸泡。
原理:溶胀溶出;优缺点:脱脂效果差;
2,新鲜猪皮用氯仿/乙醇(2:1)脱脂,切除皮下脂肪,捣碎除脂4.5mol/LNaCl的0.05mol/LTris-HCl(PH=7.5)充分洗涤。
原理:有机溶剂能够溶解脂肪,相似相溶原理;优缺点:脱脂效果好,但是有机试剂有毒,需要控制残留;
3,新鲜猪皮切薄片,35℃清水洗涤两次,4~5倍40℃温水和脱脂液(80%Na2CO3)洗一次,10min后滤去水,重复一次,最后用清水洗两次。
原理:脂肪与碳酸钠发生皂化反应;优缺点:脱脂有一定效果,但是比有机试剂差一些。
渴望旅游
2楼2013-04-08 17:52:28
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许老板

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fool_proof at 2013-04-08 17:52:28
1,新鲜猪皮切5mm以下薄片,生理盐水反复浸泡。
原理:溶胀溶出;优缺点:脱脂效果差;
2,新鲜猪皮用氯仿/乙醇(2:1)脱脂,切除皮下脂肪,捣碎除脂4.5mol/LNaCl的0.05mol/LTris-HCl(PH=7.5)充分洗涤。
原理 ...

除此之外还有其他比较好的除脂办法吗?现在普遍的是第二种么?还是其他的啊?
3楼2013-04-08 18:30:48
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许老板

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fool_proof at 2013-04-08 17:52:28
1,新鲜猪皮切5mm以下薄片,生理盐水反复浸泡。
原理:溶胀溶出;优缺点:脱脂效果差;
2,新鲜猪皮用氯仿/乙醇(2:1)脱脂,切除皮下脂肪,捣碎除脂4.5mol/LNaCl的0.05mol/LTris-HCl(PH=7.5)充分洗涤。
原理 ...

还有一个问题,有机溶剂的残留怎么控制处理啊?
4楼2013-04-08 19:49:15
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