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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 天然生物材料 » 胶原蛋白的提取前处理，除脂
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许老板

金虫 (小有名气)

[求助] 胶原蛋白的提取前处理，除脂

用猪皮提取胶原蛋白的时候，前处理有多种前处理除脂方法，想问一下各种方法的原理还有优缺点。
   1，新鲜猪皮切5mm以下薄片，生理盐水反复浸泡。
   2，新鲜猪皮用氯仿/乙醇（2：1）脱脂，切除皮下脂肪，捣碎除脂4.5mol/LNaCl的0.05mol/LTris-HCl（PH=7.5）充分洗涤。
   3，新鲜猪皮切薄片，35℃清水洗涤两次，4~5倍40℃温水和脱脂液（80％Na2CO3）洗一次，10min后滤去水，重复一次，最后用清水洗两次。
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1楼 2013-04-08 17:14:54
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fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
许老板: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 感谢感谢 2013-04-08 18:29:39
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-04-09 00:18:40
1，新鲜猪皮切5mm以下薄片，生理盐水反复浸泡。
原理：溶胀溶出；优缺点：脱脂效果差；
2，新鲜猪皮用氯仿/乙醇（2：1）脱脂，切除皮下脂肪，捣碎除脂4.5mol/LNaCl的0.05mol/LTris-HCl（PH=7.5）充分洗涤。
原理：有机溶剂能够溶解脂肪，相似相溶原理；优缺点：脱脂效果好，但是有机试剂有毒，需要控制残留；
3，新鲜猪皮切薄片，35℃清水洗涤两次，4~5倍40℃温水和脱脂液（80％Na2CO3）洗一次，10min后滤去水，重复一次，最后用清水洗两次。
原理：脂肪与碳酸钠发生皂化反应；优缺点：脱脂有一定效果，但是比有机试剂差一些。
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渴望旅游
2楼2013-04-08 17:52:28
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许老板

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fool_proof at 2013-04-08 17:52:28
1，新鲜猪皮切5mm以下薄片，生理盐水反复浸泡。
原理：溶胀溶出；优缺点：脱脂效果差；
2，新鲜猪皮用氯仿/乙醇（2：1）脱脂，切除皮下脂肪，捣碎除脂4.5mol/LNaCl的0.05mol/LTris-HCl（PH=7.5）充分洗涤。
原理 ...

除此之外还有其他比较好的除脂办法吗？现在普遍的是第二种么？还是其他的啊？
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3楼2013-04-08 18:30:48
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许老板

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fool_proof at 2013-04-08 17:52:28
1，新鲜猪皮切5mm以下薄片，生理盐水反复浸泡。
原理：溶胀溶出；优缺点：脱脂效果差；
2，新鲜猪皮用氯仿/乙醇（2：1）脱脂，切除皮下脂肪，捣碎除脂4.5mol/LNaCl的0.05mol/LTris-HCl（PH=7.5）充分洗涤。
原理 ...

还有一个问题，有机溶剂的残留怎么控制处理啊？
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4楼2013-04-08 19:49:15
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fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 许老板 at 2013-04-08 18:30:48
除此之外还有其他比较好的除脂办法吗？现在普遍的是第二种么？还是其他的啊？...

还有酶法脱脂，采用脂肪酶，也有文献报道采用超临界二氧化碳脱脂。目前来说，有机溶剂是最普遍的
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渴望旅游
5楼2013-04-09 07:59:21
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fool_proof

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 许老板 at 2013-04-08 19:49:15
还有一个问题，有机溶剂的残留怎么控制处理啊？...

挥发或者抽真空挥发或者清洗，把残留控制在一定限度之内
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渴望旅游
6楼2013-04-09 08:00:25
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rainbows1

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
7楼2013-04-09 17:25:11
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许老板

金虫 (小有名气)
在粗提胶原蛋白溶液除杂浓缩时有很多文献提到在溶液中缓慢加入１mol/L的NaOH溶液，调节pH到6或者5，然后再加氯化钠固体粉末，缓慢搅拌，4℃静置过夜保存。这一步的作用是什么？除酶吗？还有氯化钠固体需要多少(以100g猪皮计算)？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2013-04-09 18:30:52
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hyl198310

新虫 (初入文坛)
应该是将胶原盐析出来吧
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9楼2015-04-13 16:35:41
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