应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » WESTERN结果求助，膜的2头背景深。
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
41/1返回列表
查看: 697  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] WESTERN结果求助，膜的2头背景深。

同一蛋白，说明书上给的分子量是50-80KD,western做了2次，发现膜的2头背景深，一抗羊单克隆抗体，二抗是驴抗羊的（1：10000），结果见图，求解。(胶是15%的浓度，一抗二抗均购自Santa  Curz)

第一次.jpg



第2次_副本.jpg

[ Last edited by a83875785 on 2013-4-5 at 15:58 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-05 14:57:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

auroraA

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分析 2013-04-06 08:39:16
抗体残留呗,把用的东西全洗一遍,包括所有跑胶,转膜的东西,镊子等(相信你没用bare hand直接碰过膜).
再有blocking的时候让膜均匀泡在奶粉或BSA理, tween 20 千分0.5-1,别太多或太少,应该就不会有了.
应该就是个操作或者器具的问题,和抗体什么的没多大关系
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-06 02:59:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a83875785

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by auroraA at 2013-04-06 03:59:48
抗体残留呗,把用的东西全洗一遍,包括所有跑胶,转膜的东西,镊子等(相信你没用bare hand直接碰过膜).
再有blocking的时候让膜均匀泡在奶粉或BSA理, tween 20 千分0.5-1,别太多或太少,应该就不会有了.
应该就是个操作 ...

怎么做了2次都有抗体残留哦！
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-08 12:25:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

遥控器68

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

首先就怀疑膜晃的不均匀
第二就是二抗洗干净没
膜比较脏，觉得没洗干净
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-08 17:01:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 a83875785 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 学硕274求调剂 +8 Li李鱼 2026-03-26 8/400 2026-03-28 16:53 by xuxiang
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 0703化学求调剂 +9 奶油草莓. 2026-03-22 10/500 2026-03-28 13:30 by 唐沐儿
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-24 4/200 2026-03-28 13:17 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等调剂 +7 哇呼哼呼哼 2026-03-27 9/450 2026-03-28 12:22 by zllcz
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 085701环境工程求调剂 +9 多久上课 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:58 by fmesaito
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 07化学280分求调剂 +10 722865 2026-03-23 10/500 2026-03-27 15:51 by Plutoqq
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 329求调剂 +7 钮恩雪 2026-03-25 7/350 2026-03-27 04:28 by wxiongid
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭