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twisty

木虫 (正式写手)

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[求助] native-PAGE

跑酶的活性电泳，用特异底物染色后，发现泳道的三分之二部分都有酶活，产生这种现象的原因是什么？

[ 来自科研家族化学生物学 ]

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兼并碱基M=A/CR=A/GW=A/TS=G/CY=C/TK=G/TV=A/G/C&amp;n...

1楼 2013-04-04 12:58:34

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

auroraA

铁虫 (初入文坛)

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★ ★
twisty(gyesang代发): 金币+2, 鼓励交流！ 2013-04-28 02:59:55

引用回帖:

5楼: Originally posted by twisty at 2013-04-05 08:02:35
如果背景胶上有污染的酶，那么两泳道间为何被底物染了色，而泳道却消耗了底物呢？...

开始还以为整个胶上都有反应呢.
这个现象不好讲,一个可能的原因是染料stuck到胶里,没洗掉或者根本就不容易洗掉,而lane内部,由于蛋白量很高,而且各种大小,等电点的蛋白都有,所以染料反而进不去,于是就显得弱一些.
建议你可以在跑完胶后,拿出1个lane做western, 然后找你的蛋白在胶上的位置.如果你的western不是single band,而是整条lane的smear,也能解释你看到的现象