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twisty

木虫 (正式写手)

newer

[求助] native-PAGE

跑酶的活性电泳,用特异底物染色后,发现泳道的三分之二部分都有酶活,产生这种现象的原因是什么?

[ 来自科研家族 化学生物学 ]
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auroraA

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励应助,分子生物期待你的精彩。 2013-04-05 12:57:14
查一下你的酶的等电点,看看适合用什么胶(酸性胶还是碱性胶).还要看看你的蛋白是不是真的进入胶里面了,因为native gel和SDS胶在mobility上没有可比性.估计你看到的全是background,胶上有'污染"的酶
4楼2013-04-05 02:26:31
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查看全部 8 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励应助,分子生物期待你的精彩。 2013-04-05 12:56:44
native-PAGE没跑好吧。这种活性染色一般是染出条带的。
2楼2013-04-04 13:43:35
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果断悉尼

铁杆木虫 (知名作家)

三沙市名誉常务副市长

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个有专门的书籍哦 你可以到图书馆借来先学习下
我的微信号happyjk5208,谢绝闲聊
3楼2013-04-04 14:41:16
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twisty

木虫 (正式写手)

newer

引用回帖:
4楼: Originally posted by auroraA at 2013-04-05 02:26:31
查一下你的酶的等电点,看看适合用什么胶(酸性胶还是碱性胶).还要看看你的蛋白是不是真的进入胶里面了,因为native gel和SDS胶在mobility上没有可比性.估计你看到的全是background,胶上有'污染"的酶

如果背景胶上有污染的酶,那么两泳道间为何被底物染了色,而泳道却消耗了底物呢?
兼并碱基M=A/CR=A/GW=A/TS=G/CY=C/TK=G/TV=A/G/C&n...
5楼2013-04-05 08:02:35
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