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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 载体构建咨询
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_然然

金虫 (正式写手)

[求助] 载体构建咨询

问问你关于载体构建的事  载体是pShuttle-CMV   如图所示  前面一部分是shrna不需要翻译，需要rnai作用，后一段只是目的基因某一段没有起始密码子atg，需要翻译  中间t2a为自剪切多肽２Ａ，可将前后两个蛋白顺式切开     不知这样的设计能达到我们的要求吗  起始密码子atg需要加在哪？

未命名.jpg
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1楼 2013-03-29 09:26:27
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tianyinghu

金虫 (小有名气)
这样不可以的吧，后面的基因无非表达啊。
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2楼2013-03-29 11:34:58
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_然然

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tianyinghu at 2013-03-29 11:34:58
这样不可以的吧，后面的基因无非表达啊。

谢谢了 麻烦解释一下
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3楼2013-03-29 16:36:39
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biowsc1026

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
_然然(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-04-29 14:13:04
不行吧，ATG放在前面肯定会翻译的啊，得不到shRNA啊，t2a知识剪切多肽啊，又不剪切RNA。浅见，不做这方面的东西，只是看着象你这样，应该不行，你换个载体，双转录的那种，前面转录shRNA后面表达你要的蛋白。浅见，仅供参考。
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4楼2013-04-15 19:00:59
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