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_然然

金虫 (正式写手)

[求助] 载体构建咨询

问问你关于载体构建的事  载体是pShuttle-CMV   如图所示  前面一部分是shrna不需要翻译,需要rnai作用,后一段只是目的基因某一段没有起始密码子atg,需要翻译  中间t2a为自剪切多肽2A,可将前后两个蛋白顺式切开     不知这样的设计能达到我们的要求吗  起始密码子atg需要加在哪?

未命名.jpg
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tianyinghu

金虫 (小有名气)

这样不可以的吧,后面的基因无非表达啊。
2楼2013-03-29 11:34:58
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_然然

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tianyinghu at 2013-03-29 11:34:58
这样不可以的吧,后面的基因无非表达啊。

谢谢了 麻烦解释一下
3楼2013-03-29 16:36:39
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biowsc1026

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
_然然(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-04-29 14:13:04
不行吧,ATG放在前面肯定会翻译的啊,得不到shRNA啊,t2a知识剪切多肽啊,又不剪切RNA。浅见,不做这方面的东西,只是看着象你这样,应该不行,你换个载体,双转录的那种,前面转录shRNA后面表达你要的蛋白。浅见,仅供参考。
4楼2013-04-15 19:00:59
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