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hsd3521

主管区长 (知名作家)

[交流] 色谱柱柱压异常高，尝试了多种办法，请教高人

柱子型号：Jupiter C4 reversed phase column (250 mm × 4.6 mm, 300 -sized pores, 5-μm sized particles)
进样：植物蛋白粗提液，过0.45膜
流动相：70%水30%乙腈，结束试验后用100%乙腈冲洗
问题：用了两三天后，柱压奇高，达到220左右，用100%乙腈冲洗，柱压正常，在45-48之间
采取措施：超声筛板，无用；反相冲洗，无用；低流速5%甲醇冲洗两天后，采用流动相仍在190左右
所以，在此请高人指点，如果操作，为什么100%乙腈冲洗时正常，柱子真得堵了吗？
附件是我在网上搜集的液相色谱柱的清洗与再生方法，感谢大家，在此分享[ Last edited by hsd3521 on 2013-3-26 at 07:53 ]

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附件 1 : 高效液相色谱柱清洗与再生方法.pdf

2013-03-26 07:53:31, 966.76 K

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1楼 2013-03-24 09:06:25

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cxy20081015

木虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 4712.6
帖子: 38
在线: 16小时
虫号: 893467

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

你流动相中有70%的水，在实验结束后直接用100%乙腈冲洗这个应该是柱子没冲洗干净。。建议你梯度冲洗。将乙腈的浓度逐渐提升至100%。另外实验结束后。使用流动相多走一段时间。最多你冲洗的时候把检测池先关掉。如果有升柱温的话，也请梯度降温

18楼2013-03-27 11:15:24

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