应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有谁用过pETDuet-1，交流下
161/1返回列表
查看: 3321  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

山水88

木虫 (正式写手)

[交流] 有谁用过pETDuet-1，交流下

最近用pETDuet-1构建的质粒在做表达时几乎没有明显条带，不知道怎么回事呢，菌株BW25113用溶源化试剂盒已DE3化，质粒测序无误，表达条件25度，IPTG1mM，请教下有用过这个质粒做表达的大侠，帮我分析下可能原因，谢谢了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-03-22 15:48:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

淡竹2066

铜虫 (小有名气)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
我们实验室之前有人用过，但是表达以后跑了蛋白电泳发现和对照一样，就没做了。
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-22 16:29:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wtli

新虫 (初入文坛)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
这个载体表达水平一般，而且两个MCS还会有表达不均一的情况，IPTG0.5，28度又到过夜试一试
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-22 16:43:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

々暧-〃

版主 (文学泰斗)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
祝福祝福~~~~~~
回复此楼
6楼2013-03-22 23:41:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
看到文献上有用的，好像还不错，自己没用过
赞一下 回复此楼
8楼2013-03-23 17:57:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyuexinfei

木虫 (著名写手)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
表达量好像很低，但是没有做过表达，做过共转化
赞一下 回复此楼
9楼2013-03-24 12:09:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
也在用。。。
回复此楼
10楼2013-03-24 14:19:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山水88

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by liuyuexinfei at 2013-03-24 12:09:14
表达量好像很低，但是没有做过表达，做过共转化

之前用BL21（DE3）做表达出现过大量表达，现在就没有这种现象了，所以不知道其中有什么需要注意的不
赞一下 回复此楼
11楼2013-03-24 15:20:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山水88

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by alicelchf at 2013-03-24 14:19:22
也在用。。。

加油
回复此楼
12楼2013-03-24 15:20:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
质粒没什么特别的，同样是t7启动子，拷贝数同PET系列，只不过有两个MCS。我觉得不是质粒的原因，可能是你DE3溶原没有做好，你溶原后有没有做过其他表达看看啊？比如以前在BL（DE3）中表达相当好的质粒，在你新的溶原菌里面表达，效果如何？
我做过DE3溶原，说实话，效果不咋的。
赞一下 回复此楼
13楼2013-03-25 16:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山水88

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by susizheng at 2013-03-25 16:28:57
质粒没什么特别的，同样是t7启动子，拷贝数同PET系列，只不过有两个MCS。我觉得不是质粒的原因，可能是你DE3溶原没有做好，你溶原后有没有做过其他表达看看啊？比如以前在BL（DE3）中表达相当好的质粒，在你新的溶原 ...

好的，非常感谢，我再把溶源化的菌株用试剂盒验证下试试，不行就用BL21做了。
赞一下 回复此楼
14楼2013-03-25 17:09:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Rora_123

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问楼主后来表达怎样？
赞一下 回复此楼
15楼2017-07-01 21:06:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaolilin

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
选用的酶切位点是？是不是移码突变了
赞一下 回复此楼
16楼2020-03-13 13:36:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
fyz72324楼
2013-03-22 20:11   回复  
山水88(金币+1): 谢谢参与
licong95275楼
2013-03-22 20:42   回复  
山水88(金币+1): 谢谢参与
haixiawu7楼
2013-03-23 00:02   回复  
山水88(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 山水88 的主题更新
161/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本人女孩 +5 吼吼， 2026-04-10 6/300 2026-04-11 00:09 by 任文亮
[考研] 农学0904 312求调剂 +3 Say Never 2026-04-10 3/150 2026-04-10 23:24 by babysonlkd
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +3 加大号饭盒袋 2026-04-10 3/150 2026-04-10 22:23 by 286640313
[考研] 0703调剂 +19 拾玖壹 2026-04-04 22/1100 2026-04-10 22:16 by bljnqdcc
[考研] 求调剂 +5 不会飞的鱼@ 2026-04-10 5/250 2026-04-10 19:07 by chemisry
[考研] 一志愿矿大，材料工程专硕314分，0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[考研] 285求调剂 +9 AZMK 2026-04-07 11/550 2026-04-10 15:24 by AZMK
[考研] 求调剂 +15 张zic 2026-04-05 16/800 2026-04-10 08:12 by kangsm
[考研] 0703化学调剂325分 +13 15771691647 2026-04-04 15/750 2026-04-09 16:55 by 15771691647
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
[考研] 材料专硕322 +14 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-05 14/700 2026-04-09 13:25 by 5268321
[考研] 招收有机化学、化工，药学，食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 化工学硕 285求调剂 +26 Wisjxn 2026-04-07 26/1300 2026-04-08 14:42 by screening
[考研] 318求调剂 +5 李青山山山 2026-04-07 5/250 2026-04-07 18:24 by 蓝云思雨
[考研] 277求调剂 数一104分 +9 瓶子PZ 2026-04-05 14/700 2026-04-07 17:52 by 蓝云思雨
[考研] 287分求调剂 有专利国奖一志愿哈工大085406 +6 白易辰 2026-04-06 7/350 2026-04-06 22:46 by 875465
[考研] 考研调剂 +3 Wwwwwww哇 2026-04-06 3/150 2026-04-06 20:55 by lbsjt
[考研] 377求调剂 +6 by.ovo 2026-04-05 6/300 2026-04-05 22:18 by dongzh2009
[考研] 298求调剂 +7 manman511 2026-04-05 7/350 2026-04-05 10:29 by 唐沐儿
[考研] 材料调剂 +7 dxy调剂 2026-04-04 7/350 2026-04-05 09:15 by 陌秋26
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭