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山水88

木虫 (正式写手)


[交流] 有谁用过pETDuet-1,交流下

最近用pETDuet-1构建的质粒在做表达时几乎没有明显条带,不知道怎么回事呢,菌株BW25113用溶源化试剂盒已DE3化,质粒测序无误,表达条件25度,IPTG1mM,请教下有用过这个质粒做表达的大侠,帮我分析下可能原因,谢谢了
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山水88

木虫 (正式写手)


引用回帖:
9楼: Originally posted by liuyuexinfei at 2013-03-24 12:09:14
表达量好像很低,但是没有做过表达,做过共转化

之前用BL21(DE3)做表达出现过大量表达,现在就没有这种现象了,所以不知道其中有什么需要注意的不
11楼2013-03-24 15:20:06
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淡竹2066

铜虫 (小有名气)



山水88(金币+1): 谢谢参与
我们实验室之前有人用过,但是表达以后跑了蛋白电泳发现和对照一样,就没做了。
2楼2013-03-22 16:29:17
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wtli

新虫 (初入文坛)



山水88(金币+1): 谢谢参与
这个载体表达水平一般,而且两个MCS还会有表达不均一的情况,IPTG0.5,28度又到过夜试一试
3楼2013-03-22 16:43:41
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々暧-〃

版主 (文学泰斗)



山水88(金币+1): 谢谢参与
祝福祝福~~~~~~
6楼2013-03-22 23:41:49
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