24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3327  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

山水88

木虫 (正式写手)


[交流] 有谁用过pETDuet-1,交流下

最近用pETDuet-1构建的质粒在做表达时几乎没有明显条带,不知道怎么回事呢,菌株BW25113用溶源化试剂盒已DE3化,质粒测序无误,表达条件25度,IPTG1mM,请教下有用过这个质粒做表达的大侠,帮我分析下可能原因,谢谢了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山水88(金币+1): 谢谢参与
质粒没什么特别的,同样是t7启动子,拷贝数同PET系列,只不过有两个MCS。我觉得不是质粒的原因,可能是你DE3溶原没有做好,你溶原后有没有做过其他表达看看啊?比如以前在BL(DE3)中表达相当好的质粒,在你新的溶原菌里面表达,效果如何?
我做过DE3溶原,说实话,效果不咋的。
13楼2013-03-25 16:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

淡竹2066

铜虫 (小有名气)



山水88(金币+1): 谢谢参与
我们实验室之前有人用过,但是表达以后跑了蛋白电泳发现和对照一样,就没做了。
2楼2013-03-22 16:29:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wtli

新虫 (初入文坛)



山水88(金币+1): 谢谢参与
这个载体表达水平一般,而且两个MCS还会有表达不均一的情况,IPTG0.5,28度又到过夜试一试
3楼2013-03-22 16:43:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

々暧-〃

版主 (文学泰斗)



山水88(金币+1): 谢谢参与
祝福祝福~~~~~~
6楼2013-03-22 23:41:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 复试调剂 +6 积极向上; 2026-04-10 8/400 2026-04-11 06:46 by buding2230
[考研] 275求调剂 +7 1624447980 2026-04-08 8/400 2026-04-11 00:45 by dc19971224
[考研] 还有化工二轮调剂的学校吗 5+13 化工人999 2026-04-09 47/2350 2026-04-11 00:20 by 骑牛渡寒江
[考研] 286求调剂 +8 草木不言 2026-04-04 9/450 2026-04-10 23:29 by dc19971224
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +8 叶zilin 2026-04-10 8/400 2026-04-10 23:26 by 314126402
[材料工程] 材料调剂推荐 +8 蛋糕x2 2026-04-07 8/400 2026-04-10 23:13 by Ftglcn90
[论文投稿] mdpi小修rvr时间四五天了 20+3 哈哈high 2026-04-08 5/250 2026-04-10 16:02 by 北京莱茵润色
[考研] 一志愿沪9,326生物学求相关专业调剂 +4 刘墨墨 2026-04-09 4/200 2026-04-10 12:07 by pengliang8036
[考研] 化工调剂求导师收留!一志愿失利,踏实肯干,有植物提取科研经历 +17 yzyzx 2026-04-09 17/850 2026-04-10 10:29 by wp06
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 13/650 2026-04-10 10:27 by liuhuiying09
[考研] 调剂 +8 只叙离别辞 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:25 by zl8213662
[考研] 一志愿厦大生物学332求调剂 +10 池池池池池池 2026-04-08 10/500 2026-04-09 17:10 by 独醉梦孤城
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
[考研] 一志愿211,0703化学305分求调剂 +20 严西西戏 2026-04-06 26/1300 2026-04-08 22:12 by 凯凯要变帅
[考研] 生物学328分求调剂 +9 闪电kkl 2026-04-08 10/500 2026-04-08 21:42 by liuhuiying09
[考研] 307分材料专业求调剂 +12 Hll胡 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:33 by luoyongfeng
[考研] 283分求调剂 +14 试试看呗 2026-04-04 14/700 2026-04-08 07:03 by lijunpoly
[考研] 318求调剂 +5 李青山山山 2026-04-07 5/250 2026-04-07 18:24 by 蓝云思雨
[考研] 285求调剂 +5 mapmath 2026-04-06 6/300 2026-04-06 17:18 by 蓝云思雨
[考研] 316求调剂 +9 墨辰_Orion926 2026-04-04 9/450 2026-04-04 21:35 by lbsjt
信息提示
请填处理意见