应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有谁用过pETDuet-1，交流下
161/1返回列表
查看: 3328  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

山水88

木虫 (正式写手)

[交流] 有谁用过pETDuet-1，交流下

最近用pETDuet-1构建的质粒在做表达时几乎没有明显条带，不知道怎么回事呢，菌株BW25113用溶源化试剂盒已DE3化，质粒测序无误，表达条件25度，IPTG1mM，请教下有用过这个质粒做表达的大侠，帮我分析下可能原因，谢谢了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-03-22 15:48:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

淡竹2066

铜虫 (小有名气)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
我们实验室之前有人用过，但是表达以后跑了蛋白电泳发现和对照一样，就没做了。
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-22 16:29:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wtli

新虫 (初入文坛)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
这个载体表达水平一般，而且两个MCS还会有表达不均一的情况，IPTG0.5，28度又到过夜试一试
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-22 16:43:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

々暧-〃

版主 (文学泰斗)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
祝福祝福~~~~~~
回复此楼
6楼2013-03-22 23:41:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
看到文献上有用的，好像还不错，自己没用过
赞一下 回复此楼
8楼2013-03-23 17:57:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyuexinfei

木虫 (著名写手)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
表达量好像很低，但是没有做过表达，做过共转化
赞一下 回复此楼
9楼2013-03-24 12:09:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
也在用。。。
回复此楼
10楼2013-03-24 14:19:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山水88

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by liuyuexinfei at 2013-03-24 12:09:14
表达量好像很低，但是没有做过表达，做过共转化

之前用BL21（DE3）做表达出现过大量表达，现在就没有这种现象了，所以不知道其中有什么需要注意的不
赞一下 回复此楼
11楼2013-03-24 15:20:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山水88

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by alicelchf at 2013-03-24 14:19:22
也在用。。。

加油
回复此楼
12楼2013-03-24 15:20:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)
★
山水88(金币+1): 谢谢参与
质粒没什么特别的，同样是t7启动子，拷贝数同PET系列，只不过有两个MCS。我觉得不是质粒的原因，可能是你DE3溶原没有做好，你溶原后有没有做过其他表达看看啊？比如以前在BL（DE3）中表达相当好的质粒，在你新的溶原菌里面表达，效果如何？
我做过DE3溶原，说实话，效果不咋的。
赞一下 回复此楼
13楼2013-03-25 16:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山水88

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by susizheng at 2013-03-25 16:28:57
质粒没什么特别的，同样是t7启动子，拷贝数同PET系列，只不过有两个MCS。我觉得不是质粒的原因，可能是你DE3溶原没有做好，你溶原后有没有做过其他表达看看啊？比如以前在BL（DE3）中表达相当好的质粒，在你新的溶原 ...

好的，非常感谢，我再把溶源化的菌株用试剂盒验证下试试，不行就用BL21做了。
赞一下 回复此楼
14楼2013-03-25 17:09:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Rora_123

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问楼主后来表达怎样？
赞一下 回复此楼
15楼2017-07-01 21:06:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaolilin

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
选用的酶切位点是？是不是移码突变了
赞一下 回复此楼
16楼2020-03-13 13:36:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
fyz72324楼
2013-03-22 20:11   回复  
山水88(金币+1): 谢谢参与
licong95275楼
2013-03-22 20:42   回复  
山水88(金币+1): 谢谢参与
haixiawu7楼
2013-03-23 00:02   回复  
山水88(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 山水88 的主题更新
161/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿哈工大 085600 277 12材科基求调剂 5+3 chenny174 2026-04-10 17/850 2026-04-11 00:26 by 骑牛渡寒江
[考研] 326求调剂 +5 Shansyn 2026-04-10 5/250 2026-04-10 22:23 by 猪会飞
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考研] 本科西工大 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:00 by 来看流星雨10
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[基金申请] 有爆料，一个青年教师卖房得400万，然后换了一个四青帽子 +9 babu2015 2026-04-08 9/450 2026-04-10 11:43 by 苏东坡二世
[考研] 调剂 +4 青灯不负 2026-04-09 4/200 2026-04-10 09:55 by LHGeng
[考研] 301求调剂 +6 静静想想 2026-04-05 6/300 2026-04-10 09:15 by Delta2012
[考研] 生物学求调剂 一志愿沪9，326分 +7 刘墨墨 2026-04-06 7/350 2026-04-10 08:11 by kangsm
[考研] 一志愿 江南大学 085602 化工专硕 338分求调剂 +16 路痴小琪 2026-04-05 16/800 2026-04-10 08:08 by kangsm
[考研] 求调剂 +5 archer.. 2026-04-09 7/350 2026-04-09 22:18 by lbsjt
[考研] 267求调剂 +5 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 5/250 2026-04-09 18:47 by stone_128
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +24 额cc 2026-04-06 25/1250 2026-04-09 16:01 by wp06
[考研] 材料求调剂 +18 一样YWY 2026-04-05 18/900 2026-04-07 15:49 by dxlg
[考研] 362求调剂一志愿中国石油大学 +4 我要考大 2026-04-06 6/300 2026-04-06 14:11 by 无际的草原
[考研] 285求调剂 +8 AZMK 2026-04-04 11/550 2026-04-06 13:56 by BruceLiu320
[考研] 专硕304找调剂，一线城市最好 +3 李lsl李 2026-04-05 3/150 2026-04-06 12:16 by ffffjjjj
[考研] 材料专硕322分 +10 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 21:22 by 学员8dgXkO
[考研] 怎么删帖子啊 +3 缝曦1000 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:20 by 土木硕士招生
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭