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山水88

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[交流] 有谁用过pETDuet-1，交流下

最近用pETDuet-1构建的质粒在做表达时几乎没有明显条带，不知道怎么回事呢，菌株BW25113用溶源化试剂盒已DE3化，质粒测序无误，表达条件25度，IPTG1mM，请教下有用过这个质粒做表达的大侠，帮我分析下可能原因，谢谢了

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1楼 2013-03-22 15:48:47

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山水88

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引用回帖:

13楼: Originally posted by susizheng at 2013-03-25 16:28:57
质粒没什么特别的，同样是t7启动子，拷贝数同PET系列，只不过有两个MCS。我觉得不是质粒的原因，可能是你DE3溶原没有做好，你溶原后有没有做过其他表达看看啊？比如以前在BL（DE3）中表达相当好的质粒，在你新的溶原 ...

好的，非常感谢，我再把溶源化的菌株用试剂盒验证下试试，不行就用BL21做了。