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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SSR分子标记的时候为什么部分DNA不能跑出来
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forgive09

新虫 (初入文坛)

[求助] SSR分子标记的时候为什么部分DNA不能跑出来

本人在做苦瓜SSR的分子标记，但是几次过后，总是有部分DNA的条带不能跑出来，现在我用的是6%聚丙烯酰胺在跑电泳。电压是300V，跑的时间3个小时。到底是体系没有优化好呢，还是其他的什么问题呢？版里谁做过SSR标记的给我支个招，看看我做的苦瓜SSR的分子标记问题出在哪里，给点参考建议，我下面该如何是好？不胜感激

20130320C11FC11R(27~47).jpg
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1楼 2013-03-21 00:11:47
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rommel1941

铁杆木虫 (正式写手)

情定山河

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
跑之前把缓冲液冻成冰块，跑得时候放进缓冲液降温，希望对你有帮助。
从胶图上看不出什么问题。不知道你困扰在什么地方。
祝好
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将相本无种★男儿当自强
3楼2013-03-21 14:15:13
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rommel1941

铁杆木虫 (正式写手)

情定山河

【答案】应助回帖

恕我直言，你的问题就很含糊。一个个体出现多少条带并没有一定的，尤其是SSR这种短串联标记，这就是所谓个体差异。不是说每个个体都会出现预期的条带。如果motif=2，片段差2个碱基在凝胶你基本分析不出来。用SSR标记最好的检验方法是荧光标记因无，通过genescan才是分辨的最好方法，使用凝胶分析只是看个皮毛，粗略掌握以下Locus的多态性。
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forgive09
将相本无种★男儿当自强
7楼2013-03-23 14:50:05
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rommel1941

铁杆木虫 (正式写手)

情定山河
要是本科论文，还不如直接磁珠筛选，你去检测多样性，不是来的更简单。
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将相本无种★男儿当自强
10楼2013-03-25 14:39:02
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