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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大肠杆菌感受态制备问题
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husthl

铁虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌感受态制备问题

我最近在制备两种感受态E.coli Rosetta和BL21(DE3)，制备感受态之前对种子检验看其知否染菌，结果在含有Kan和Amp的LB中都没有长，而在没有加抗生素的LB中长得很正常。可以断定种子没有染菌。
结果制备的感受态对其进行检验，在含有Kan的平板中有杂菌落出现，而在Amp的平板上没有菌落出现，这是为什么咧?很神奇啊。
注：抗生素应该没有问题的哦
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向风一样的双子女
1楼 2013-03-20 17:32:59
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王平阳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2013-03-27 13:40:43
应该是操作原因，Kana分布不均或者浓度太低或者抗性降低（冻融次数多了就会降低），又或者是倒平板的时候培养基温度太高，反正原因很多。
我的建议是：在涂平板时候在菌液里也加上Kana，浓度按正常浓度的2倍，如果这样还有杂菌，那就是Kana有问题或者感受态污染。
赞一下(2人) 回复此楼
没有做不到，只有想不到！
2楼2013-03-27 11:36:12
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husthl

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 王平阳 at 2013-03-27 11:36:12
应该是操作原因，Kana分布不均或者浓度太低或者抗性降低（冻融次数多了就会降低），又或者是倒平板的时候培养基温度太高，反正原因很多。
我的建议是：在涂平板时候在菌液里也加上Kana，浓度按正常浓度的2倍，如果 ...

哦，谢谢
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向风一样的双子女
3楼2013-03-27 12:50:13
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