24小时热门版块排行榜    

查看: 3568  |  回复: 28
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

犁头狗

新虫 (初入文坛)

[求助] T-A克隆一直做不出来

片段345bp,用Taq酶扩增纯化后测得浓度为49.3ng/ul,用Takara pmd 19-T simple vector试剂盒连接,严格按照说明书操作,感受态细胞为DH5a,蓝白斑筛选结果 阴性对照没有菌落,阳性对照均为白色菌落,但是实验平板上却全是蓝色菌落,重复三次结果都一样,不知道原因在哪啊?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用的什么酶扩增的?高保增需要加A的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
修炼ing,当虫仙……
4楼2013-03-18 09:02:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 29 个回答

liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-03-18 18:04:11
实验平板上却全是蓝色菌落,说明片段没连上.

Vector DNA和Insert DNA的摩尔比一般为:1:2~10。

你连接时间是多久呢??

我们实验室通常连接过夜呢.
2楼2013-03-17 22:59:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

犁头狗

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-03-17 22:59:20
实验平板上却全是蓝色菌落,说明片段没连上.

Vector DNA和Insert DNA的摩尔比一般为:1:2~10。

你连接时间是多久呢??

我们实验室通常连接过夜呢.

我也是连接过夜的
3楼2013-03-17 23:07:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

robustli

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-06-01 11:08:11
你可以随便扩增一条不相关的片度,试试看能不能插进去,如果能,就针对目的基因设计一条引物。
immunologyparasite
5楼2013-03-18 10:08:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +12 爱看书的可乐 2026-08-26 14/700 2026-08-26 12:49 by coolysnow
[基金申请] 系统查不到 +9 董八千 2026-08-26 9/450 2026-08-26 12:30 by yanmofang
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 怎么查啊 +4 huang1991js 2026-08-26 4/200 2026-08-26 11:26 by panjy.cn
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +6 process2012 2026-08-23 8/400 2026-08-26 11:03 by zjlp
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 出来了 +8 trojank 2026-08-26 8/400 2026-08-26 09:00 by gxc
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +21 羊腰板 2026-08-21 24/1200 2026-08-26 07:20 by finnigan
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
信息提示
请填处理意见