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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 浓度梯度，退火温度梯度都做了，PCR结果还是这样，求大神帮忙
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newmeer

新虫 (初入文坛)

[求助] 浓度梯度，退火温度梯度都做了，PCR结果还是这样，求大神帮忙

一直P不出来，今天做了个退火温度的梯度，还是这样子。帮忙看看，谢谢！
25微升体系：
buffer  2.5
dNTP   2
P1+P2  0.5+0.5
ddH2O 19
Taq      0.5
之前没做退火温度也是有很多条带，下面是引物二聚体么？

原样和稀释10X后退火温度梯度.jpg
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1楼 2013-03-13 10:58:24
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这是什么PCR，真核生物的吗？详细的说明下先。。。
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生物化学与分子生物学
2楼2013-03-13 11:21:12
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
P的什么模板，用量是多少？还有，点样孔怎么那么亮？
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3楼2013-03-13 14:33:04
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lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
请问你的模板在buffer里吗？还是没加？
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寻找真正的自我！
4楼2013-03-13 14:37:40
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清高剑客

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上样孔太亮,要么是胶有问题，要么是片段太大跑不动？
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武可定天下,计谋何足道!
5楼2013-03-13 15:53:48
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雅典娜1008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主的Marker呢？上样孔那么亮，是不是胶有问题呀？
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平静、淡然、感恩
6楼2013-03-13 16:12:07
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newmeer

新虫 (初入文坛)
额，不好意思，已经找到原因了，第一次做退火梯度，有些东西弄错了。谢谢各位虫友！
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7楼2013-03-13 17:44:24
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