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隔夜凉白开

新虫 (小有名气)

[求助] 求大神来帮忙看看q-PCR扩增曲线，都快崩溃了~

每张图中为一个target3个复孔。大侠帮忙看看一般是什么问题导致的？

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1楼 2013-02-26 19:58:33
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wangcheng2650

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
隔夜凉白开: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-02-27 16:35:48
模板浓度太高，引物特异性不高！
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日子是混出来的！
2楼2013-02-26 21:12:34
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Hannahtg

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
隔夜凉白开: 金币+1, ★有帮助 2013-02-27 16:36:40
模板量加的太多了？如果是三个重复的话，你的technical replicates需要加强啊！
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3楼2013-02-26 21:14:21
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Hannahtg

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
隔夜凉白开: 金币+1, ★有帮助 2013-02-27 16:36:45
嗯，二楼也觉得是模板量加的多，因为在第十个cycle，amplificaiton 曲线就上升了
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4楼2013-02-26 21:16:50
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隔夜凉白开

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wangcheng2650 at 2013-02-26 21:12:34
模板浓度太高，引物特异性不高！

是的，稀释1000倍，预混液，搞定了。
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5楼2013-02-27 16:36:19
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