应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 古菌PCR阴性对照为什么有条带啊？
51/1返回列表
查看: 1758  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

eagle_edu

金虫 (正式写手)

[求助] 古菌PCR阴性对照为什么有条带啊？

古菌PCR阴性对照有条带了，不知什么原因，我是用的958F和1408这两种引物。PCR体系是用的天根的mix，单独跑阴性对照也会出现条带。这是什么原因呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-06 20:31:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by eagle_edu at 2013-03-07 10:31:22
谢谢！我扩的是古菌的V6区，引物是用的文献上提供的，很多都用这个引物，水的话公司提供的和自己灭菌的都用了，只是公司提供的水扩增后阴性对照条带暗一些，自己灭菌的水条带很亮，与marker对照，几乎在100BP...

如果这个100bp与你的目标片段大小不同，倒是可以用，将背景调暗就行了。如果在同一个位置，个人觉得就不可用，有的实验结果确实是很难或者无法重复的。
赞一下 回复此楼
5楼2013-03-07 14:10:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
eagle_edu: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-03-07 10:31:17
你的阴性对照用的模板是公司里买的PCR专用水吗？
如果不是，可以考虑换一下水。
如果是，那么，提高退火温度试试。
如果提高退火温度还不行，那么，就只有换引物我觉得。此外，超纯水灭菌30分钟只能把DNA打成弥散，以我的经验，植物基因组总DNA灭菌后，打成10-400bp的弥散DNA，可以用于基因组原位杂交。如果你设计引物扩增片段很短的话，就容易出现你提到的情况。
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-07 09:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

eagle_edu

金虫 (正式写手)
谢谢！我扩的是古菌的V6区，引物是用的文献上提供的，很多都用这个引物，水的话公司提供的和自己灭菌的都用了，只是公司提供的水扩增后阴性对照条带暗一些，自己灭菌的水条带很亮，与marker对照，几乎在100BP
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-07 10:30:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

eagle_edu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenguestc at 2013-03-07 09:33:39
你的阴性对照用的模板是公司里买的PCR专用水吗？
如果不是，可以考虑换一下水。
如果是，那么，提高退火温度试试。
如果提高退火温度还不行，那么，就只有换引物我觉得。此外，超纯水灭菌30分钟只能把DNA打成弥散 ...

谢谢！我扩的是古菌的V6区，引物是用的文献上提供的，很多都用这个引物，水的话公司提供的和自己灭菌的都用了，只是公司提供的水扩增后阴性对照条带暗一些，自己灭菌的水条带很亮，与marker对照，几乎在100BP
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-07 10:31:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +8 wangyl_123 2026-10-10 12/600 2026-10-13 20:40 by Merryya
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +9 Isak0320 2026-10-12 13/650 2026-10-13 11:57 by Isak0320
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +4 好运来～9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +6 13108017953 2026-10-08 6/300 2026-10-12 20:07 by w3w3y3
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭