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遥控器68

金虫 (小有名气)

[求助] MEGA进行聚类分析中使用的序列是什么序列?怎样获得?

如题:使用MEGA5进行一类蛋白的聚类分析,网上有很漂亮的图(图2),我也想制作这种图。纯新手,请大家给讲解一下,越详细越好。谢过啦~~~

1.  使用DNA,mRNA,cDNA,coding sequence还是直接使用amino acid sequence来制作?对于这点很迷茫(许多文章中都是通过NCBI用关键词在Genbank里搜索出这类蛋白的所有基因,在用些well characterized 蛋白进行 tblastn ;或者各种blast,但究竟是用的哪种序列更confident和reliable呢)

2.  我现在只知道从uniprot中搜到aa sequence,里面可以找到mRNA和Genomic DNA(图1),但是后面各自又有个Translation,不明白这是什么意思,哪个是我所需要的聚类用的序列?或者都不是。
              如果它们都不是,那我又从哪里获得序列呢?

图1.jpg



图2.jpg
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遥控器68

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wizardfan at 2013-03-07 08:02:37
1. 序列选择看需要,如果是做蛋白的,当然用氨基酸序列,如果研究进化的,DNA序列更恰当
2. translation就是DNA翻译成的蛋白质序列
3. 这个图应该是后处理过的,看树软件有treeview, njplot,都很简单

感谢。还有些不明白,追问下
对于第一个问题,用DNA序列研究进化,那么aa序列是研究什么呢,仅仅是相似性么?
第二个问题,点开translation的连接,给的还是mRNA序列,不明白为什么。两者各自的同一个页面下都有翻译好的蛋白序列。要是用蛋白序列的话,我是用这里的呢 还是说在蛋白数据库里搜索?
第三个问题中说的两个还没用过,试试~
4楼2013-03-07 09:30:59
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查看全部 5 个回答

遥控器68

金虫 (小有名气)

顶,不能沉了,请大家给点参考吧
2楼2013-03-07 00:13:59
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wizardfan

至尊木虫 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
遥控器68: 金币+5, 有帮助 2013-03-07 09:31:15
1. 序列选择看需要,如果是做蛋白的,当然用氨基酸序列,如果研究进化的,DNA序列更恰当
2. translation就是DNA翻译成的蛋白质序列
3. 这个图应该是后处理过的,看树软件有treeview, njplot,都很简单
3楼2013-03-07 08:02:37
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wizardfan

至尊木虫 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
遥控器68: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-03-07 18:20:19
引用回帖:
4楼: Originally posted by 遥控器68 at 2013-03-07 09:30:59
感谢。还有些不明白,追问下
对于第一个问题,用DNA序列研究进化,那么aa序列是研究什么呢,仅仅是相似性么?
第二个问题,点开translation的连接,给的还是mRNA序列,不明白为什么。两者各自的同一个页面下都有 ...

1. some DNA mutations are silent, i.e. the corresponding protein sequence is the same. The protein alignment can give you better idea about the effect of the mutation, e.g. structural change, antibody design etc.
2. the translated protein sequences should be fine
5楼2013-03-07 17:52:07
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