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sd3824289

木虫 (正式写手)


[交流] SDS-PAGE图总是这样,大家有没有好的建议

我做原核表达,诱导完了之后SDS-PAGE,结果图总是跑歪了,不知道是什么原因,请各位高手指点指点!
    而且我怎么在图上看不到差异表达的蛋白呢?是不是载体根本就没有表达?表达条件1mM IPTG 诱导5h,33-35℃。

蛋白.jpg
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494750284

木虫 (小有名气)



sd3824289(金币+1): 谢谢参与
你把没点样的孔点SDS loading buffer了吗
5楼2013-01-10 17:43:03
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查看全部 17 个回答

userhung

禁虫 (文学泰斗)


4楼2013-01-10 17:31:02
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wenzonglu

木虫 (正式写手)



sd3824289(金币+1): 谢谢参与
标准条带都跑得那么差,无语。降低电流延长电泳时间,胶两端边的孔不用(不加样,可只加上样缓冲液)。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2013-01-10 17:49:49
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alicelchf

木虫 (著名写手)



sd3824289(金币+1): 谢谢参与
你的样品是多大的?
建议重新表达吧
上样量可以降低100或者200ul菌体离心处理 就可以
8楼2013-01-10 19:57:05
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