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eagle_edu

金虫 (正式写手)

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[求助] 求助水样中总DNA 的提取！

目前，我用MoBio 强力土壤 DNA 提取试剂盒 PowerSoil™ DNA Isolation Kit 提取油田水样中的微生物总DNA，首先是用0.22的微孔滤膜过滤，然后剪碎加入到试剂盒中，按步骤提取，为什么总是提不出来？实验室室温10-14度，谢谢！

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1楼2013-01-07 00:08:10

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eagle_edu

金虫 (正式写手)

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引用回帖:

4楼: Originally posted by kiruwa at 2013-01-07 14:02:59
我以前用过和你类似方法,也提不出来,建议你可以采用MO BIO 提取水样的kit. 这个土壤kit似乎对水样没用.

水样的好贵啊

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8楼2013-01-08 09:37:12

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cqlsf

至尊木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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laozuzunzhe: 金币+3, good！ 2013-01-07 19:35:51
eagle_edu: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-01-08 09:33:47

建议：1看水样中其他杂质是否过多？是否需要初步沉淀除杂、去油污，去除提DNA的干扰？
2、样品中微生物种群及数量初步估计，数量很多还是极其稀少？是真菌多还是细菌多？G+还是G-? 如果数量极少，需要浓缩富集，是滤膜过滤还是离心沉淀等？
3、提取出来的DNA有时很稀少，常规电泳看不到，可通过PCR放大看看，紫外光度计看看，到底有没有？
祝顺利！