应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » AFLP选扩弥散，无很明显主带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
141/2返回列表12下一页
查看: 1090  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

bluesun5198

银虫 (小有名气)

[求助] AFLP选扩弥散，无很明显主带

做基因组DNA, AFLP引物筛选，第一张图是预扩增琼脂糖检测结果，第一排是我的预扩产物（下面是帮人带的样）60V 1h， 1%的胶，没注意显色剂Gelred和胶的比例，故跑的不是很好。（酶切连接产物没有稀释直接做的预扩）

后面两张都是同一块选扩的胶，一个是正常曝光，另一个是过曝光的，由于点样孔漏了，故只有前两排孔比较完整。3%的胶，70V 50分钟捡的，感觉选扩的引物没有一个能用的，不想上聚丙酰胺凝胶了，想直接跑荧光了。（选扩引物是师姐留下的，时间有点久，溶液-20大概放了1年了，不知道还能用不）

求高人指点，是我选扩体系的问题，还是引物的问题，还是说我的预扩出问题了。可以直接上荧光不？关键荧光引物贵啊。求指点啊

dell 2012-12-27 13hr 55min52(2) LY6 L1 L2 L24 L25 H21 H20.jpg



dell 2012-12-31 14hr 09min选扩1.jpg



dell 2012-12-31 14hr 13min过曝光.jpg

[ Last edited by bluesun5198 on 2013-1-3 at 23:00 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-03 22:50:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

小河弯弯07

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
bluesun5198: 金币+10, ★有帮助 2013-01-04 15:52:29
建议还是跑聚丙烯酰胺凝胶电泳，我觉得引物没问题，就是带没跑开。另外，上样量，胶浓，电泳电压，时间都需要你自己摸索优化。
赞一下(2人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

bluesun5198
2楼2013-01-04 09:33:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

liugs

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

bluesun5198
3楼2013-01-04 11:21:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bluesun5198

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小河弯弯07 at 2013-01-04 09:33:35
建议还是跑聚丙烯酰胺凝胶电泳，我觉得引物没问题，就是带没跑开。另外，上样量，胶浓，电泳电压，时间都需要你自己摸索优化。

谢谢回复，我再摸索摸索，非常感谢
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-04 15:51:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bluesun5198

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by liugs at 2013-01-04 11:21:17
没有检测之前都不知道呢,先检测几个试试吧！

好的，谢谢
回复此楼
5楼2013-01-04 15:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bluesun5198

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小河弯弯07 at 2013-01-04 09:33:35
建议还是跑聚丙烯酰胺凝胶电泳，我觉得引物没问题，就是带没跑开。另外，上样量，胶浓，电泳电压，时间都需要你自己摸索优化。

但是为什么预扩产物基本正常，而选扩又在大于750bp处出现了条带呢
赞一下 回复此楼
6楼2013-01-04 15:54:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小河弯弯07

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by bluesun5198 at 2013-01-04 15:54:24
但是为什么预扩产物基本正常，而选扩又在大于750bp处出现了条带呢...

我都是选扩完直接跑聚丙烯酰胺的，预扩、选扩都不跑琼脂糖
赞一下 回复此楼
7楼2013-01-05 13:58:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bluesun5198

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 小河弯弯07 at 2013-01-05 13:58:45
我都是选扩完直接跑聚丙烯酰胺的，预扩、选扩都不跑琼脂糖...

哦，谢谢，今天用重新做的预扩产物做的选扩，感觉效果好了些，有几个样品酶切产物应该有问题。我再继续试试，多谢指点
赞一下 回复此楼
8楼2013-01-05 18:52:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小河弯弯07

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by bluesun5198 at 2013-01-05 18:52:50
哦，谢谢，今天用重新做的预扩产物做的选扩，感觉效果好了些，有几个样品酶切产物应该有问题。我再继续试试，多谢指点...

对你有帮助就行，实验不理想原因实在太多了，某个环节出问题都会影响最终的结果，最好自然就是重做咯，祝你实验顺利~
赞一下 回复此楼
9楼2013-01-07 09:58:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyonghu

木虫 (小有名气)
你好
你的AFLP做的怎么样了？
我遇到同样的问题了，请教
赞一下 回复此楼
10楼2013-03-05 18:08:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bluesun5198 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 303求调剂 +5 DLkz1314. 2026-03-30 5/250 2026-03-30 20:06 by 无际的草原
[考研] 309求调剂 +15 谁不是少年 2026-03-29 15/750 2026-03-30 19:28 by 2026材料调剂
[考研] 一志愿郑大材料工程290求调剂 +9 Youth_ 2026-03-30 9/450 2026-03-30 18:45 by 544594351
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +16 李李不服输 2026-03-26 16/800 2026-03-30 17:47 by wangjy2002
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业，初试351分，复试被刷求调剂! +6 真名有冰 2026-03-29 7/350 2026-03-30 16:36 by herarysara
[考研] 0703化学 +14 妮妮ninicgb 2026-03-27 14/700 2026-03-30 12:46 by fangnagu
[硕博家园] 求调剂 有机化学考研356分 +10 Nadiums 2026-03-25 11/550 2026-03-30 11:56 by yjolah
[考研] 375求调剂 +6 雨夏整夜 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:21 by herarysara
[考研] 295求调剂 +5 wei-5 2026-03-26 5/250 2026-03-30 08:34 by 探123
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-24 6/300 2026-03-29 20:45 by 无际的草原
[考研] 275求调剂 +15 Micky11223 2026-03-25 20/1000 2026-03-29 20:44 by 唐沐儿
[考研] 调剂310 +12 温柔的晚安 2026-03-25 13/650 2026-03-29 20:01 by 无际的草原
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学，化工，生物，生医工等专业优秀学子加入！ +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[考研] 083000学硕274求调剂 +8 Li李鱼 2026-03-26 8/400 2026-03-28 20:33 by 加油向未来啊
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭