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cxb-abc

银虫 (小有名气)

[交流] AFLP预扩增不呈现弥散带已有4人参与

,大家好,我做AFLP的,目前预扩增扩不出来弥散带,只在100-250bp油条畸形带,我把所有东西都换了一边,还是找不到原因,请大家帮忙分析下,下面是i问题图片
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  • 2012-06-12 08:47:16, 64.32 K

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shucanwei

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
从Marker来看,条带是低了些,我觉得还是做下去吧,可能PAGE胶电泳的结果会好些呢。
走完它吧
唯以一人治天下,不以天下奉一人。
2楼2012-06-12 22:25:34
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wcg129

禁虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

3楼2012-06-13 10:47:57
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xiaoxiong520

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主往下做了吗,我用cDNA做的,预扩增是弥散的,可是选扩不是清晰的条带,是弥散的!之前用DNA做的选扩条带清晰
4楼2012-06-13 10:59:56
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pmln

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
直接做选扩看看。我做aflp预扩检测和图3比较像,然后就做了选扩。个人试验经验来看,酶切一步是最重要的,影响预扩。

[ Last edited by pmln on 2012-6-13 at 17:19 ]
5楼2012-06-13 17:17:30
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cxb-abc

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wcg129 at 2012-06-13 10:47:57
DNA的还是cDNA的?
从头尽量描述清楚些,否则只看结果不好分析
还有楼上的建议也可试试

我做的是DNA,酶切也是切开了,1%琼脂糖检测过,但是与扩增没有面带,怀疑是连接没有连上,真急人,做了好几遍了,还是连不上,不知但问题出在哪里?
6楼2012-06-20 21:16:05
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cxb-abc

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaoxiong520 at 2012-06-13 10:59:56
楼主往下做了吗,我用cDNA做的,预扩增是弥散的,可是选扩不是清晰的条带,是弥散的!之前用DNA做的选扩条带清晰

往下做了,Page胶只有一条带200 bp 左右
7楼2012-06-20 21:17:07
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cxb-abc

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by pmln at 2012-06-13 17:17:30
直接做选扩看看。我做aflp预扩检测和图3比较像,然后就做了选扩。个人试验经验来看,酶切一步是最重要的,影响预扩。

酶切检测结果都切开了,切了12小时,切得效果挺好。
8楼2012-06-20 21:18:21
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cxb-abc

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wcg129 at 2012-06-13 10:47:57
DNA的还是cDNA的?
从头尽量描述清楚些,否则只看结果不好分析
还有楼上的建议也可试试

谢谢,我做的事DNA,帮我分析一下预扩增为何出现下端有一条带的现象,还有为何我的预扩结果不是弥散的,而是月亮型的,特别的奇怪,
9楼2012-06-20 21:31:03
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