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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » AFLP预扩增不呈现弥散带
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cxb-abc

银虫 (小有名气)

[交流] AFLP预扩增不呈现弥散带 已有4人参与

，大家好，我做AFLP的，目前预扩增扩不出来弥散带，只在100-250bp油条畸形带，我把所有东西都换了一边，还是找不到原因，请大家帮忙分析下，下面是i问题图片
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  • 附件 1 : 问题图.jpg
    • 2012-06-12 08:47:16, 64.32 K

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1楼 2012-06-12 08:47:49
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shucanwei

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
从Marker来看，条带是低了些，我觉得还是做下去吧，可能PAGE胶电泳的结果会好些呢。
走完它吧
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唯以一人治天下，不以天下奉一人。
2楼2012-06-12 22:25:34
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wcg129

禁虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
3楼2012-06-13 10:47:57
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xiaoxiong520

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主往下做了吗，我用cDNA做的，预扩增是弥散的，可是选扩不是清晰的条带，是弥散的！之前用DNA做的选扩条带清晰
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4楼2012-06-13 10:59:56
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pmln

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
直接做选扩看看。我做aflp预扩检测和图3比较像，然后就做了选扩。个人试验经验来看，酶切一步是最重要的，影响预扩。

[ Last edited by pmln on 2012-6-13 at 17:19 ]
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5楼2012-06-13 17:17:30
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cxb-abc

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wcg129 at 2012-06-13 10:47:57
DNA的还是cDNA的？
从头尽量描述清楚些，否则只看结果不好分析
还有楼上的建议也可试试

我做的是DNA，酶切也是切开了，1%琼脂糖检测过，但是与扩增没有面带，怀疑是连接没有连上，真急人，做了好几遍了，还是连不上，不知但问题出在哪里？
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6楼2012-06-20 21:16:05
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cxb-abc

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaoxiong520 at 2012-06-13 10:59:56
楼主往下做了吗，我用cDNA做的，预扩增是弥散的，可是选扩不是清晰的条带，是弥散的！之前用DNA做的选扩条带清晰

往下做了，Page胶只有一条带200 bp 左右
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7楼2012-06-20 21:17:07
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cxb-abc

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by pmln at 2012-06-13 17:17:30
直接做选扩看看。我做aflp预扩检测和图3比较像，然后就做了选扩。个人试验经验来看，酶切一步是最重要的，影响预扩。

酶切检测结果都切开了，切了12小时，切得效果挺好。
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8楼2012-06-20 21:18:21
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cxb-abc

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wcg129 at 2012-06-13 10:47:57
DNA的还是cDNA的？
从头尽量描述清楚些，否则只看结果不好分析
还有楼上的建议也可试试

谢谢，我做的事DNA，帮我分析一下预扩增为何出现下端有一条带的现象，还有为何我的预扩结果不是弥散的，而是月亮型的，特别的奇怪，
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9楼2012-06-20 21:31:03
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