| 查看: 1339 | 回复: 13 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
bluesun5198银虫 (小有名气)
|
[求助]
AFLP选扩弥散，无很明显主带
|
|
|
做基因组DNA, AFLP引物筛选，第一张图是预扩增琼脂糖检测结果，第一排是我的预扩产物（下面是帮人带的样）60V 1h， 1%的胶，没注意显色剂Gelred和胶的比例，故跑的不是很好。（酶切连接产物没有稀释直接做的预扩） 后面两张都是同一块选扩的胶，一个是正常曝光，另一个是过曝光的，由于点样孔漏了，故只有前两排孔比较完整。3%的胶，70V 50分钟捡的，感觉选扩的引物没有一个能用的，不想上聚丙酰胺凝胶了，想直接跑荧光了。（选扩引物是师姐留下的，时间有点久，溶液-20大概放了1年了，不知道还能用不） 求高人指点，是我选扩体系的问题，还是引物的问题，还是说我的预扩出问题了。可以直接上荧光不？关键荧光引物贵啊。求指点啊  dell 2012-12-27 13hr 55min52(2) LY6 L1 L2 L24 L25 H21 H20.jpg  dell 2012-12-31 14hr 09min选扩1.jpg  dell 2012-12-31 14hr 13min过曝光.jpg [ Last edited by bluesun5198 on 2013-1-3 at 23:00 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有143人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- AFLP (MSAP) 中双酶切后 预扩增条带很好，选扩增弥散了，求助高手指点啊！万分感谢！
已经有14人回复
- AFLP预扩增不呈现弥散带
已经有8人回复
- 【求助/交流】AFLP选扩产物弥散，请做过AFLP的同行们耽误几分钟帮忙看看
已经有5人回复
bluesun51983楼2013-01-04 11:21:17
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
bluesun5198: 金币+10, ★有帮助 2013-01-04 15:52:29
感谢参与，应助指数 +1
bluesun5198: 金币+10, ★有帮助 2013-01-04 15:52:29
| 建议还是跑聚丙烯酰胺凝胶电泳，我觉得引物没问题，就是带没跑开。另外，上样量，胶浓，电泳电压，时间都需要你自己摸索优化。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
2楼2013-01-04 09:33:35
bluesun5198
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 246.4
- 散金: 150
- 红花: 7
- 帖子: 56
- 在线: 56.9小时
- 虫号: 1174774
- 注册: 2010-12-21
- 专业: 观赏园艺学
4楼2013-01-04 15:51:09
bluesun5198
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 246.4
- 散金: 150
- 红花: 7
- 帖子: 56
- 在线: 56.9小时
- 虫号: 1174774
- 注册: 2010-12-21
- 专业: 观赏园艺学
5楼2013-01-04 15:51:54
100