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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请各位大侠帮忙看看我的聚丙烯酰胺凝胶电泳图
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无形居士2009

金虫 (正式写手)

[求助] 请各位大侠帮忙看看我的聚丙烯酰胺凝胶电泳图

我跑的是非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，从电泳图上看：电泳条带弥散，看不清；发卡结构通过退火后有一部分形成了二聚体结构；
相交各位有经验的神人，是不是我凝胶配置的不好啊？怎么才能减少扩散呢？
我的跑胶条件是：电压 140V  电流25 mA 跑了三个小时 在EB里面染色10 min 清水洗后成像。
发卡结构退火温度是90度 5min  不应该二聚体形成啊？怎么减少二聚体呢   急求~~谢谢大家了

20121226-2.jpg



[ Last edited by 无形居士2009 on 2012-12-27 at 16:40 ]
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1楼 2012-12-27 09:49:51
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ccharlien

木虫 (正式写手)
扫胶的时候把焦距调准啊 看的都晕了...
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4楼2012-12-29 22:48:41
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
无形居士2009: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-30 08:57:32
条带跑散和凝胶的配制经常有很大关系。

尝试稍微增大凝胶浓度、降低电压试试。
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2楼2012-12-29 11:14:00
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121however

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
无形居士2009: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-30 08:57:25
跑胶的时候注意一下温度不要过高，另外降低电压，增大教的浓度试试
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3楼2012-12-29 20:49:50
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
无形居士2009: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-30 08:57:00
建议上个marker，便于判断是样品的问题还是胶的问题。
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5楼2012-12-30 02:59:17
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