24小时热门版块排行榜    

查看: 1760  |  回复: 10

无形居士2009

金虫 (正式写手)

[求助] 请各位大侠帮忙看看我的聚丙烯酰胺凝胶电泳图

我跑的是非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,从电泳图上看:电泳条带弥散,看不清;发卡结构通过退火后有一部分形成了二聚体结构;
相交各位有经验的神人,是不是我凝胶配置的不好啊?怎么才能减少扩散呢?
我的跑胶条件是:电压 140V  电流25 mA 跑了三个小时 在EB里面染色10 min 清水洗后成像。
发卡结构退火温度是90度 5min  不应该二聚体形成啊?怎么减少二聚体呢   急求~~谢谢大家了

20121226-2.jpg



[ Last edited by 无形居士2009 on 2012-12-27 at 16:40 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ccharlien

木虫 (正式写手)

扫胶的时候把焦距调准啊 看的都晕了...
4楼2012-12-29 22:48:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
无形居士2009: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-30 08:57:32
条带跑散和凝胶的配制经常有很大关系。

尝试稍微增大凝胶浓度、降低电压试试。
2楼2012-12-29 11:14:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

121however

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
无形居士2009: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-30 08:57:25
跑胶的时候注意一下温度不要过高,另外降低电压,增大教的浓度试试
3楼2012-12-29 20:49:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
无形居士2009: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-30 08:57:00
建议上个marker,便于判断是样品的问题还是胶的问题。
5楼2012-12-30 02:59:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无形居士2009

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ccharlien at 2012-12-29 22:48:41
扫胶的时候把焦距调准啊 看的都晕了...

我都是自动聚焦  我也觉得成的像不好看  怎么自己调焦距啊
6楼2012-12-30 08:55:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无形居士2009

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by greeneese at 2012-12-29 11:14:00
条带跑散和凝胶的配制经常有很大关系。

尝试稍微增大凝胶浓度、降低电压试试。

一般跑胶时的温度是多少啊?电压你们保持多少啊?我这是10%的胶 跑的DNA是  100个base和50base
7楼2012-12-30 08:56:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无形居士2009

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-30 02:59:17
建议上个marker,便于判断是样品的问题还是胶的问题。

恩  我试试 谢谢
8楼2012-12-30 08:56:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 无形居士2009 at 2012-12-30 08:56:26
一般跑胶时的温度是多少啊?电压你们保持多少啊?我这是10%的胶 跑的DNA是  100个base和50base...

温度我们一般不严格控制,但电泳的一般原则是温度不宜过高,大型的电泳槽一般都要通冷却水带走电泳过程中产生的热量。电压也不会有固定值,根据上一次用的电压和电泳的结果调整,比如某条件下电泳条带弥散就要降低电压。
9楼2012-12-30 10:50:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
无形居士2009: 金币+5, 有帮助, 谢谢 2013-01-12 09:05:27
1、可以试试银染,效果应该比EB好。
2、PAGE跑DNA的话,要用循环水降温啊,不然会扩散厉害。
生物资源交流QQ群:1044518333
10楼2012-12-30 13:27:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 无形居士2009 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +9 不知道叫什么! 2026-03-15 10/500 2026-03-16 10:04 by houyaoxu
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+5 NSFC2026我来了 2026-03-10 14/700 2026-03-15 23:53 by 不负韶华的虎
[考研] 274求调剂 +4 时间点 2026-03-13 4/200 2026-03-15 15:29 by Rambo13
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 清风问长安 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:15 by JourneyLucky
[考研] 一志愿浙江大学0856材料与化工求调剂 +4 yansheng@211 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:10 by JourneyLucky
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工296分求调剂 +16 稻妻小编 2026-03-09 18/900 2026-03-14 02:00 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 小木虫085600 2026-03-09 12/600 2026-03-14 01:11 by JourneyLucky
[考研] 材料工程专硕,一志愿中国矿业大学,总分314,求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 285化工学硕求调剂(081700) +6 柴郡猫_ 2026-03-12 6/300 2026-03-13 20:46 by hmn_wj
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +6 Liyouyumairs 2026-03-11 6/300 2026-03-13 20:11 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考研] 哈工大材料324求调剂 +6 闫旭东 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:49 by 星空星月
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
信息提示
请填处理意见