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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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无形居士2009

金虫 (正式写手)

[求助] 请各位大侠帮忙看看我的聚丙烯酰胺凝胶电泳图

我跑的是非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,从电泳图上看:电泳条带弥散,看不清;发卡结构通过退火后有一部分形成了二聚体结构;
相交各位有经验的神人,是不是我凝胶配置的不好啊?怎么才能减少扩散呢?
我的跑胶条件是:电压 140V  电流25 mA 跑了三个小时 在EB里面染色10 min 清水洗后成像。
发卡结构退火温度是90度 5min  不应该二聚体形成啊?怎么减少二聚体呢   急求~~谢谢大家了

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[ Last edited by 无形居士2009 on 2012-12-27 at 16:40 ]
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
无形居士2009: 金币+5, 有帮助, 谢谢 2013-01-12 09:05:27
1、可以试试银染,效果应该比EB好。
2、PAGE跑DNA的话,要用循环水降温啊,不然会扩散厉害。
生物资源交流QQ群:1044518333
10楼2012-12-30 13:27:56
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
无形居士2009: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-30 08:57:32
条带跑散和凝胶的配制经常有很大关系。

尝试稍微增大凝胶浓度、降低电压试试。
2楼2012-12-29 11:14:00
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121however

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
无形居士2009: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-30 08:57:25
跑胶的时候注意一下温度不要过高,另外降低电压,增大教的浓度试试
3楼2012-12-29 20:49:50
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ccharlien

木虫 (正式写手)

扫胶的时候把焦距调准啊 看的都晕了...
4楼2012-12-29 22:48:41
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