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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒ＰＣＲ扩不出目的条带，且有杂带，但是直接测序有结果？为什么？？？？？
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070250035

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒ＰＣＲ扩不出目的条带，且有杂带，但是直接测序有结果？为什么？？？？？ 已有1人参与

求有关大麦ＮＩＡＳＨＶ基因的文章，万分感谢！
质粒ＰＣＲ扩不出目的条带，且有杂带，但是直接测序有结果？为什么？？？？
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探究知识的海洋
1楼 2012-12-26 16:43:09
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ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的意思是质粒是对的 扩不出PCR？
那就是引物和PCR体系的问题了 仔细检查排除吧
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2楼2012-12-26 20:24:45
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
测序对的话说明质粒没问题，P不出来多半是你的条件有问题。可能模板用量太大了。P质粒是时候模板用pg级别的就足够了。
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3楼2012-12-27 01:45:00
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果质粒确定是没有问题的话，那可能就是PCR体系出问题了吧。。。比如引物突变了。。。
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keepon
4楼2012-12-27 09:26:27
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395655631

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
2012年在plosone有一篇关于大麦的文章，你可以看看
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5楼2012-12-29 16:38:33
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tuojianbo

铜虫 (初入文坛)
测序时送的引物污染影响结果吗
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6楼2013-04-26 19:45:52
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liuxing12345

铜虫 (初入文坛)
应该是PCR体系出了问题
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7楼2013-12-11 09:23:08
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loveerobin

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

重新合成引物
或者换下反应体系的反应液
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8楼2013-12-11 13:56:47
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