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将两个基因串联到启动子下面，两个基因都能表达么？
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| 想请问各位大侠，如果我将两个基因GFP、neo基因串联到A3启动子下游，两个基因都是完整的阅读框，中间用内切酶Not I酶切连接。下游再加上加尾信号和反向重复序列。这样子GFP和neo两个基因都能表达么？ |
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 分子问题及解决方案汇总 | 细胞生物学实验经验 |
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凌波丽
专家顾问 (知名作家)
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- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
| 目前一种常用的方法是利用荧光来侦测已经接受DNA的细胞。通常将欲表达的基因克隆到含有绿色荧光蛋白的基因的载体上，接受此载体而且表达出绿色荧光蛋白的基因的细胞，在荧光显微镜下呈绿色。若欲表达的基因与绿色荧光蛋白的基因融合，而且由同一个启动子进行转录，制造出的mRNA会含有两个基因的序列，当翻译第一个基因而碰到终止密码子时，核糖体会从mRNA上掉下来，造成第二个基因无法表达。解决这个问题的方法是，在两个基因间加入一个内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)序列，让第二个基因可由内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)序列处进行翻译，如此两个基因就可以同时被翻译，制造出不同的蛋白质。 |
49楼2013-07-06 22:47:27