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761429495

新虫 (小有名气)

[交流] 毕赤酵母表达载体

童鞋们：
毕赤酵母表达载体有哪些含有组氨酸标签？
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1楼 2012-11-29 20:46:00
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★
761429495(金币+1): 谢谢参与
这个不用找吧，把His标签设计在引物里，一起构建不就行了？引物合成长一点也无所谓的吧。
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2楼2012-11-30 00:35:50
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761429495

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-30 00:35:50
这个不用找吧，把His标签设计在引物里，一起构建不就行了？引物合成长一点也无所谓的吧。

哦 ，谢谢哈，那是不是把组氨酸加在C端起始密码子ATG之后，设计引物啊？它会不会影响蛋白表达活性呢？:
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3楼2012-11-30 08:47:46
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liujianmin68

木虫 (职业作家)
★
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pPIC3.5K、pPIC9K应该都用His标签，你可以在网上搜一下Invitrogen公司的毕赤酵母产品的手册。上面介绍的很详细。
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4楼2012-11-30 08:57:58
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linxt2005

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
pPIC3.5k 没有 His 标签。
pPICZalpha 类有，在C-端，这个事用得比较多的，还有pPIC9k也是带有His tag
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5楼2012-11-30 09:31:47
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761429495

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liujianmin68 at 2012-11-30 08:57:58
pPIC3.5K、pPIC9K应该都用His标签，你可以在网上搜一下Invitrogen公司的毕赤酵母产品的手册。上面介绍的很详细。

我这说的事纯化的时候用的组氨酸标签，9K应该没有吧 呼呼
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6楼2012-11-30 09:50:54
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by 761429495 at 2012-11-30 08:47:46
哦 ，谢谢哈，那是不是把组氨酸加在C端起始密码子ATG之后，设计引物啊？它会不会影响蛋白表达活性呢？:...

C端没有起始密码子哦。
影响不影响蛋白表达活性，这个不好说啊。
要看你想将标签放在哪端
N端的话，就ATG-His6-你的基因
C端的话，你的基因（去终止子）-His6
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7楼2012-11-30 10:18:33
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761429495

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-30 10:18:33
C端没有起始密码子哦。
影响不影响蛋白表达活性，这个不好说啊。
要看你想将标签放在哪端
N端的话，就ATG-His6-你的基因
C端的话，你的基因（去终止子）-His6...

哦，谢谢你啊 ，那像你说的 ，C端的话，我的基因（去终止子）-His6 ，His6后面是不是要再加个终止子呢
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8楼2012-11-30 13:03:24
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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8楼: Originally posted by 761429495 at 2012-11-30 13:03:24
哦，谢谢你啊 ，那像你说的 ，C端的话，我的基因（去终止子）-His6 ，His6后面是不是要再加个终止子呢...

是这样子，肯定要加终止子的
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9楼2012-11-30 13:10:37
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76142949510楼
2012-11-30 14:20   回复  
引用回帖:
9楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-30 13:10:37 是这样子，肯定要加终止子的...

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