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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 第一次PCR产物电泳没有条带，请问用同一条引物跑2次PCR，能跑出条带吗？
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sherrysure

银虫 (小有名气)

[求助] 第一次PCR产物电泳没有条带，请问用同一条引物跑2次PCR，能跑出条带吗？

第一次PCR没有跑出条带来，
第二次用前一次的PCR产物作模板，
其他条件都相同，请问这样子有没有跑出条带来的可能呢？

如果不行，应该用什么方法改进？
第一轮产物所用模板理论上是可以跑出条带来的。
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1楼 2012-11-13 11:50:43
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chachaxionga

新虫 (正式写手)
这个是有可能的，楼主可以尝试一下，核算电泳的分辨率是很低的，如果第一次扩增的量很少时，可能检测不到，你可以跑一下第二轮PCR。但是你PCR扩增不出来是有很多因素，多考虑一下，找到一个优化的条件
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7楼2012-11-14 13:45:56
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mutant

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不行吧！你应该多设计几个退火温度啊！
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2楼2012-11-13 17:31:08
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张力民

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-11-14 07:57:50
有可能会扩增出来，但我建议用touch down PCR可能会管用。或者减低退火温度。
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3楼2012-11-13 21:16:40
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以的，我以前干过这事，但如果你第一次鉴定没有条带的话，估计悬，试试吧
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4楼2012-11-14 08:40:10
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