应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于卫星菌落
51/1返回列表
查看: 8362  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

summergca

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于卫星菌落

最近在做转化，感受态用的是Top 10，质粒a是Amp抗性（浓度100ug/ul），在37℃，过夜培养，大概13小时左右，有卫星菌落；
   后来增加Amp浓度，150ug/ul，同样培养条件，还是有卫星菌落生长；
   用pUC18、pUC19转化的时候，没有卫星菌落
   Amp是索来宝的，质粒a是老师自己构建的，他说是抗生素问题……
     大神们帮我分析分析吧~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-10-15 09:54:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by summergca at 2012-10-15 11:19:07
单克隆比卫星菌落大一点，可以挑起来，在LB中生长时间就是特别慢
上次转pUC18、pUC19到Top，挑单菌落，15ml的管子，接了7ml，摇了二十来个小时，菌浓度还是比较低

？Top10本身生长速度也不是这么慢...

15ml的管子最好接2-3ml，7ml太多了，进气不足，菌长得慢。
赞一下 回复此楼
8楼2012-10-15 13:26:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
summergca: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-30 17:14:17
你这Amp浓度也太高了吧，终浓度100ug/ul？终浓度一般都100ug/ml的吧，你这别说卫星菌落了，13小时估计一颗菌都不会长吧，你Amp肯定失效了，充沛吧，我100ug/ml终浓度的培养基，37℃24h都不长卫星菌落.
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

summergca
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
2楼2012-10-15 10:13:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这个浓度。。。。是打错了吧。。。一般都是采用100mg/ml配AMP，然后1:1000的加入培养基。

Amp抗生素就是有这个缺点，我们实验室的Amp也有这个毛病，它比较不稳定，实效短，易降解。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

summergca
3楼2012-10-15 10:55:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

summergca

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Marado at 2012-10-15 10:13:33
你这Amp浓度也太高了吧，终浓度100ug/ul？终浓度一般都100ug/ml的吧，你这别说卫星菌落了，13小时估计一颗菌都不会长吧，你Amp肯定失效了，充沛吧，我100ug/ml终浓度的培养基，37℃24h都不长卫星菌落.

不好意思，打错了，终浓度是100ug/ml，
赞一下 回复此楼
4楼2012-10-15 11:06:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +8 Mr. Z 2026-03-25 8/400 2026-03-25 23:00 by peike
[考研] 26考研-291分-厦门大学（085601）-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 材料277求调剂 +4 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 15:29 by fch1983
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 0703化学求调剂 +6 奶油草莓. 2026-03-22 7/350 2026-03-25 10:00 by shangxh
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +3 钢铁大炮 2026-03-24 3/150 2026-03-24 22:03 by bingxueer79
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭