24小时热门版块排行榜    

查看: 8514  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

summergca

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于卫星菌落

最近在做转化,感受态用的是Top 10,质粒a是Amp抗性(浓度100ug/ul),在37℃,过夜培养,大概13小时左右,有卫星菌落;
   后来增加Amp浓度,150ug/ul,同样培养条件,还是有卫星菌落生长;
   用pUC18、pUC19转化的时候,没有卫星菌落
   Amp是索来宝的,质粒a是老师自己构建的,他说是抗生素问题……
     大神们帮我分析分析吧~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

summergca

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Marado at 2012-10-15 11:12:10
卫星菌落都起来了,单克隆菌落应该已经比较明显了吧,如果你的菌在平板长得快的话,可以考虑8小时就挑单菌落,我的菌不行,我的12小时都不太明显……

单克隆比卫星菌落大一点,可以挑起来,在LB中生长时间就是特别慢
上次转pUC18、pUC19到Top,挑单菌落,15ml的管子,接了7ml,摇了二十来个小时,菌浓度还是比较低

?Top10本身生长速度也不是这么慢
7楼2012-10-15 11:19:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
summergca: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-30 17:14:17
你这Amp浓度也太高了吧,终浓度100ug/ul?终浓度一般都100ug/ml的吧,你这别说卫星菌落了,13小时估计一颗菌都不会长吧,你Amp肯定失效了,充沛吧,我100ug/ml终浓度的培养基,37℃24h都不长卫星菌落.

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
2楼2012-10-15 10:13:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这个浓度。。。。是打错了吧。。。一般都是采用100mg/ml配AMP,然后1:1000的加入培养基。

Amp抗生素就是有这个缺点,我们实验室的Amp也有这个毛病,它比较不稳定,实效短,易降解。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2012-10-15 10:55:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

summergca

铜虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Marado at 2012-10-15 10:13:33
你这Amp浓度也太高了吧,终浓度100ug/ul?终浓度一般都100ug/ml的吧,你这别说卫星菌落了,13小时估计一颗菌都不会长吧,你Amp肯定失效了,充沛吧,我100ug/ml终浓度的培养基,37℃24h都不长卫星菌落.

不好意思,打错了,终浓度是100ug/ml,
4楼2012-10-15 11:06:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 9/450 2026-08-11 22:12 by 医学老男孩
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
信息提示
请填处理意见