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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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summergca

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于卫星菌落

最近在做转化，感受态用的是Top 10，质粒a是Amp抗性（浓度100ug/ul），在37℃，过夜培养，大概13小时左右，有卫星菌落；
   后来增加Amp浓度，150ug/ul，同样培养条件，还是有卫星菌落生长；
   用pUC18、pUC19转化的时候，没有卫星菌落
   Amp是索来宝的，质粒a是老师自己构建的，他说是抗生素问题……
     大神们帮我分析分析吧~
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1楼 2012-10-15 09:54:59
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

卫星菌落都起来了，单克隆菌落应该已经比较明显了吧，如果你的菌在平板长得快的话，可以考虑8小时就挑单菌落，我的菌不行，我的12小时都不太明显……
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6楼2012-10-15 11:12:10
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
summergca: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-30 17:14:17
你这Amp浓度也太高了吧，终浓度100ug/ul？终浓度一般都100ug/ml的吧，你这别说卫星菌落了，13小时估计一颗菌都不会长吧，你Amp肯定失效了，充沛吧，我100ug/ml终浓度的培养基，37℃24h都不长卫星菌落.
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summergca
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2楼2012-10-15 10:13:33
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gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这个浓度。。。。是打错了吧。。。一般都是采用100mg/ml配AMP，然后1:1000的加入培养基。

Amp抗生素就是有这个缺点，我们实验室的Amp也有这个毛病，它比较不稳定，实效短，易降解。
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summergca
3楼2012-10-15 10:55:17
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summergca

铜虫 (初入文坛)
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引用回帖:
2楼: Originally posted by Marado at 2012-10-15 10:13:33
你这Amp浓度也太高了吧，终浓度100ug/ul？终浓度一般都100ug/ml的吧，你这别说卫星菌落了，13小时估计一颗菌都不会长吧，你Amp肯定失效了，充沛吧，我100ug/ml终浓度的培养基，37℃24h都不长卫星菌落.

不好意思，打错了，终浓度是100ug/ml，
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4楼2012-10-15 11:06:18
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