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ding_winnie

无虫 (小有名气)

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在线: 20.9小时
虫号: 1545259

[交流] PCR实验疑问

各位在做PCR的时候有没有出现过这样的情况，25ul体系可以得到很好的目的条带，但是同样的条件，50ul就不能得到目的条带。而且这样的情况并不是每次都会出现，只针对某些基因片段。

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1楼 2012-10-09 18:57:14

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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★
ding_winnie(金币+1): 谢谢参与

这个我也遇到过，说不清原因。最后干脆就做25ul的了。如果PCR的效率不错的话回收克隆也够用了。

6楼2012-10-10 08:52:02

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asdkingstar

金虫 (正式写手)

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★ ★
ding_winnie(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-10 19:15:16

分子实验就是这样，第一次做可能有，但是第二次就没有，第三次还是没有，可是第4次又有了，它对条件要求很高，所以就会出现楼主这样的情况。随便更改个条件就会出现很多问题。

2楼2012-10-09 20:32:02

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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

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★
ding_winnie(金币+1): 谢谢参与

确实好多分子实验都说不清楚的。楼主的反应体系就是对应加大的吗？也有可能是操作的问题,我也经常碰到类似情况。。。

3楼2012-10-09 21:05:41

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飞飞0123

新虫 (初入文坛)

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★
ding_winnie(金币+1): 谢谢参与

我今天就出现同样问题了，第一次负对照出现条带了，第二次做又所有的没有条带了，真不知道哪出问题了唉

4楼2012-10-09 21:13:18

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